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如所使用的血球计数板有16个中方格-于都中学
血球计数板结构 用血球计数板计数酵母菌的数量(25×16型) * 人教版 实验课题 培养液中酵母菌种群数量的变化 一、目的要求 1、探究培养液中的酵母菌种群数量的变化,建构种群增长的数学模型 2、解释种群数量变化的原因,指出影响种群数量变动的因素 3、正确使用显微镜、血球计数板等实验器材解决实验问题 4、明确探究实验的一般步骤并能恰当评价和完善实验方案 二、材料用具 酵母菌、和无菌马铃薯培养液或肉汤培养液、试管 血球计数板、滴管、显微镜、高压灭菌锅、恒温箱等。 血球计数板是由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的.玻片中有四条下凹的槽,构成三个平台.中间的平台较宽,其中间又被一短横槽隔为两半,每半边上面,刻有一个方格网.方格网上刻有9个大方格, 盖玻片下培养液厚度0.1mm 血球计数板是方格网上刻有9个大方格,其中只有中间的一个大方格为计数室,供微生物计数用.这一大方格的长和宽各为1mm,深度为0.1mm,其体积为0.1mm3. 计数室通常有两种规格.一种是大方格内分为16中格,每一中格又分为25小格;另一种是大方格内分为25中格,每一中格又分为16小格.但是不管计数室是哪一种构造;它们都有一个共同的特点,即每一大方格都是由16×25=25×16=400个小方格组成. 血球计数板 取清洁无油的血球计数板 在计数室上面加盖玻片 取酵母菌液,摇匀 用滴管由盖玻片边缘滴一小滴,使菌液自行渗入 静止5min 用低倍镜观察并将计数室移至视野中央 在高倍镜下计数 计数完毕后,血球计数板要立即清洗干净 计数五个中格的细胞数(左上、右上、左下、右下和中央),然后求得 计数室中400个小方格的细胞数,最后再换算到每mL菌液中的含菌数。 压在中方格线上的菌体,以压在上方线和右侧线上的菌体计入本格内;。 例:如所使用的血球计数板有16个中方格,每l中方格中有25个小方格,每1个大方格容积为0.1mm3(1mL=1000mm3)。 请推导出1毫升培养液中酵母菌细胞的计算公式: 酵母细胞个数/1mL= 。 (100小格内酵母菌细胞数/100)×400×104×稀释倍数 平均每个小方格的酵母菌细胞数×400×104×稀释倍数 例:血球计数板的计数室长和宽各为1mm,深度为0.1mm,其中25×16型的血球计数板计数室以双线等分成25个中方格,每个中方格又分成16个小方格。一般计数时选取的中方格位于计数室的 。下图表示的是其中一个中方格的情况,对该中方格中的酵母菌进行计数的结果是 个。如果计数的几个中方格中的细胞平均数为20个,则1mL培养液中酵母菌的总数为 个。 四个角和中央 24 5×106 三、实验探究的一般过程: 1、提出问题: 培养液中酵母菌种群数量的变化与温度有关吗? 2、作出假设: 培养液中酵母菌种群数量的变化与温度有关 3、实验探究过程 第一步:配制无菌马铃薯葡萄糖培养液或肉汤培养液。 第二步:取相同试管若干支,分别加入5ml肉汤培养液。 第三步:用高压锅进行高压蒸汽灭菌后冷却至室温,标记甲、 乙、丙。 第四步:将等量酵母菌母液分别加各各试管中,摇匀后用血球 计数板计数起始酵母菌个数,做好记录。 第五步:将各装置放在不同的温度下培养。 第六步:连续7天,每天同一时间,取出试管,用血球计数板 计数酵母菌个数,做好记录。 记录表格 4、分析结果,得出结论: 1、将所得数值用曲线图表示出来,分析实验结果是否支持你所做的假设。 2、探究的结论是: 例如:培养液中酵母菌种群数量的变化与温度有关 5、实验中相关的问题 1、从试管中吸出培养液进行计数之前,建议你将试管轻轻震荡几次。这是为什么? 2、如果一个小方格内酵母菌过多,难以数清,应当采取怎样的措施? 3、对于压在方格界线上的酵母菌,应当怎样计数? 4、怎样记录结果?记录表怎样设计? 四、进一步探究 1、培养液中酵母菌种群数量与时间的变化关系? 2、探究不同的培养液浓度下种群数量的动态变化? 3、探究不同的温度下种群数量的动态变化? ◆ 实验:土壤中小动物类群丰富度的研究 1.实验原理 (1)土壤是无数小动物的家园。 (2)许多土壤动物身体微小且有较强的活动能力,可用采样器取样进行采集、调查,通过调查样本中小动物的种类和数量来推测某一区域内土壤动物的丰富度。 (3)丰富度统计方法通常有两种:记名计算法和目测估计法。
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