发情牛血清对绵羊卵母细胞体外成熟及孤雌胚发育的影响.pdfVIP

·130· 遗传繁育 中国畜牧兽医 2012年第39卷第4期 发情牛血清对绵羊卵母细胞体外成熟及 孤雌胚发育的影响 李佳佳1，马利兵1。籍凤字1’2，陈秀莉1·3 (1．内蒙古科技大学数理与生物工程学院，内蒙古包头0140lo，2．包头医学院第一附属医院，内蒙古包头014010； 3．包头师范学院生物科学与技术学院，内蒙古包头014030) 摘要：在动物卵母细胞体外成熟及胚胎体外培养体系中添加一定浓度的发情牛血清可能提高卵母细胞的成熟率及胚胎 的发育率。本研究以屠宰场卵巢来源的绵羊卵母细胞为试验材料，探讨了发情牛血清对绵羊卵母细胞体外成熟及孤雌胚发 育的影响。结果表明，成熟液中添加10％第1天的发情牛血清能显著提高绵羊卵母缅胞的体外成熟率及孤雌胚卵裂率(_P 0．05)}孤雌胚体外培养72 h后，向培养液中添加10％第7天的发情牛血清能显著提高绵羊孤雌胚的桑囊胚率(P0．05)。结 果表明．发情牛血清能够促进绵羊卵母细胞的体外成熟率及孤雌胚发育率。 关键词：卵母细胞；发情牛血清；孤雌胚；体外成熟；绵羊 中图分类号：S826 文献标识码：A 文章编号：167l一7236(2012)04一0130一04 随着体外授精技术、体细胞核移植技术和动物 牛血清来源充足，且较容易制备，但其能否促进其它 转基因技术的快速发展，对卵母细咆的需求量日益 动物卵母细胞的体外成熟率及胚胎的体外发育率， 增加。对于大型家畜，如牛、羊等，采用超数排卵获 有关这方面的问题还有待迸一步的研究。本研究以 取体内自然成熟的卵母细胞已不能满足科学研究和 屠宰场卵巢来源的绵羊卵母细胞为试验材料，探讨 实际生产的需要，利用屠宰厂卵巢尹源的、体外培养 不同发情天数牛血清对绵羊卵母细胞体外成熟率及 成熟的卵母细胞已成为解决卵源问题的有效途径。 孤雌胚体外发育率的影响，以期建立一个更加高效、 目前，卵母细胞的体外成熟培养技术还不是很完善， 完善的绵羊卵母细胞成熟及胚胎体外培养体系。 成熟率较低，且体外培养成熟的卵母细胞的质量低 l材料与方法 于体内自然成熟的卵以细胞的质量。因此，建立一 1．1 试剂 FSH、I，H购自宁波激素二厂；M199、 bovine 个高效、优质的卵母细胞体外培养体系十分必要。 胎牛血清(fetal serum，FBS)、必需氨基酸、 以往的卵母细胞体外成熟培养体系中，大多添加胎 非必需氨基酸均购自Gibco公司；青霉素、链霉素为 牛血清(石德顺等，】996)。研究结果表明，培养液中国产；其余试剂除特别说明外，所用试剂均购自于 添加发情牛血清，能显著提高牛卵母细胞的体外成 si．}fma公司a j． 1．2发情牛血清的制备发情牛血清采自包头懋 熟率(文国艺等，1996)。此外，在动物早期胚胎的体 外培养体系中，一般不添加血清，即使添加也是在 菲蒙奶业股份有限公司奶牛场。在牛群中选取体况 8一细胞及以后时期，且添加的大多为商业化的胎牛 良好，发情周期正常且记聚准确的发情牛进行采血。 血清。研究结果表明，发情山羊血清能提高孤雌激 为减小牛血清个体差异对试验结果的影响，以发情 当天为第1天，分别选取发情第l、3、5、7天的牛各 活的牛胚胎的体外发育率(张志平等，2003)。发情 5头，采用颈部采血，每头牛采50 mL。采集到的血 收稿日期：2011-0