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实操四 甲基红(MR)试验和乙酰甲基甲醇试验(V～P试验) 一、甲基红(MR)试验 1．实验目的 (1)了解甲基红试验的反应原理和用途。 (2)学习甲基红试验的操作技术。 2．原理 多数细菌能分解葡萄糖，但分解葡萄糖的途径和产物不完全相同。例如大肠杆菌和产气肠杆菌能分解葡萄糖产生丙酮酸，若继续代谢还能生成其它有机酸和醛、醇等化合物。其中，大肠杆菌所产生的酸能使培养液的pH降到4.2或更低，可使甲基红指示剂变成红色，并至少持续4d之久。因此，甲基红试验是测定细菌利用葡萄糖产酸能力的强弱。但这些微生物可将产生的酸进一步代谢，在4d或更长时间内生成中性化合物，不具有使甲基红变红的能力。因此进行这项试验时，观察时间显得很重要。肠道杆菌生长在37℃以下4d观察为宜，其它细菌也可参照同样时间。 3．实验材料 (1)菌种 大肠杆菌(Escherichia coli)和产气杆菌（Enterobacter aerogenes)。 (2)培养基 缓冲葡萄糖蛋白胨水(附录Ⅲ一9)。 (3)其它 酒精棉球，酒精灯，接种环，恒温箱等。 (4)试剂 甲基红试剂(附录Ⅲ一46)。 4．方法与步骤 取缓冲葡萄糖蛋白胨水培养基试管三支，于其上分别做好培养基名称和试验菌种、空白样等标记，然后无菌操作将实验菌种接入相应的试管中，连同空白对照置36℃±1℃恒温箱中培养2～4d后进行观察