实验七 人类血型与PTC尝味能力.pptVIP

实验七 人类血型与PTC尝味能力的鉴定及群体遗传平衡的检测 * * * * 实验目的 1. 掌握ABO血型鉴定的原理和方法 2. 掌握PTC尝味实验的原理和方法 3. 掌握遗传平衡定律的应用及检验方法 * * ① PTC尝味能力的鉴定 ② ABO血型的鉴定 ③ 群体遗传平衡的检测 实验内容 PTC尝味能力的鉴定 实验原理： PTC（苯硫脲）是一种白色结晶物质，有苦涩味，对人无毒副作用。人对苯硫脲的尝味能力属于不完全显性遗传，由一对等位基因T和t 控制。 * * ①3种不同浓度的PTC溶液： 1/500 000 1/50 000 1/25 000 按浓度由低到高进行品尝！ ②确定并记录基因型： 1/500 000: TT 1/50 000 : Tt 1/25 00 : tt （味盲，是一类完全正常的人群） 实验方法步骤 back ①：每人取一张干净载玻片，在两端标 明A、B。 ②：70%酒精消毒无名指，取血2滴分别置于A、B两端。 ③：分别在A、B处滴加抗A和抗B血清各一滴。 ④：用牙签搅拌混匀。 ⑤：观察有无凝集反应发生。 ABO血型的鉴定 back 卡方检验的原理 检测PTC尝味能力 检测ABO血型 * * 群体平衡的检测 * * 如何判断一个群体是否平衡？ fAA＝p2 fAa＝2pq faa＝q2 群体的三种基因型频率是否满足 * * fAA=0.6 fAa=0.2 faa=0.2 fDD=0.16 fDd=0.48 fdd=0.36 fDD=0.15 fDd=0.47 fdd=0.38 卡方检验的原理 * * 差异 两 种 原 因 必然因素 偶然因素 fDD=0.16 fDd=0.48 fdd=0.36 fDD=0.15 fDd=0.47 fdd=0.38 * * 必然因素 本质原因，这种差异大,不能忽略不计。 偶然因素 非本质因素，如抽样误差等等。这种差异小,可忽略不计。 如何判断差异由何种因素引起? 用卡方检验判断！ back PTC尝味能力的检测 目的：检测PTC尝味能力在待测人群中的分布是否符合Hardy -weinberg遗传平衡定律。 原理：寻找（假设）一个理论的平衡人群，将待测人群与其比较。 若两种人群差异为非本质差异：则待测人群是平衡人群，即PTC尝味能力在该人群分布已达到平衡。 若两种人群差异为本质差异：则待测人群不是平衡人群，即PTC尝味能力在该人群分布未达到平衡。 两种人群的差异原因 偶然因素 必然因素 非本质差异 本质差异 根据原理，设计下表 基因型个体数 TT Tt tt 实际观察值(O) 预期理论值(E) X2=∑(O-E) 2/E 具体步骤 X2检验 提出假设：本班级人群的PTC尝味能力分布符合Hardy-Weinberg平衡。建立检验水准α=0.05。 完善表格：填入实际观察值→计算预期理论值 基因型个体数 TT Tt tt 实际观察值(O) 预期理论值(E) p2×N 2pq ×N q2×N X2=∑(O-E) 2/E back Go 计算X2值： Go 推出P值： Go 得出最后结论: * * 预期理论值计算方法 计算基因频率p，q： p= q= 计算理论基因型频率： TT基因型频率：p2，Tt基因型频率：2pq tt基因型频率：q2 计算预期理论值（E）： 预期理论值= 理论基因型频率×总人数N ↑ * * X2值计算方法 X2=∑ ↑ (O-E )2 E P值推算方法 统计学上的常用术语，指随机变量能自由取值的个数。 如一个样本有4个数据(n=4)，受到平均数等于5的条件限制，那么在自由确定了3个数据4、2、5后，最后一个数只能是9。所以自由度等于3。 任何统计量的自由度=n-限制条件的个数 P值的含义：代表平衡人群与待测人群的差异由偶然因素引起的可能性。 推算方法：确定自由度，查χ2界值表，得出p值大小。 基因型个体数 TT Tt tt 实际观察值(O) 预期理论值(E) 如何确定本表格的自由度？ 自由度=（表型数量-1）-1 = 2-1 = 1 X2界值表 ↑ * * 结论推出方法 当p≤α(0.05)时，拒绝假设。即所检测的两组人群(平衡人群与待测人群)之间的差异是由偶然因素造成的可能性(p)＜0.05，由必然因素所致的可能性大，两组人群有本质差异，拒绝检验假设。 当p＞α(0.05)时，不拒绝检验假设。即所检测的两组人群(平衡人群与待测