间隙连接蛋白Cx31. 1 相互作用蛋白的初步鉴定.pdf

第 33 卷第 7 期Vol.33, No.7 生 殖 与 避 孕 doi: 10.7669/j.issn.0253-357X.2013.07.0433 2013 年7 月Jul. 2013 Reproduction Contraception E-mail: randc_journal@163.com ·实验研究· 间隙连接蛋白Cx31.1相互作用蛋白的初步鉴定 阮振超1 朱杏丽1 褚凯丽1 李元春2 黄 燕1 (1.复旦大学生命科学学院, 遗传学研究所, 遗传工程国家重点实验室, 上海, 200433) (2. 国家卫生与计划生育委员会计划生育药具重点实验室, 上海市计划生育科学研究所, 上海, 200032) 【摘要】目的: 筛选间隙连接蛋白31.1(Cx31.1) 的相互作用蛋白, 进一步阐释Cx31.1 在生殖健康 方面可能的作用机制。方法: 采用免疫共沉淀技术富集稳定表达Cx31.1-EGFP 融合蛋白细胞中的 Cx31.1 结合蛋白, 以稳定表达EGFP 标签蛋白的细胞作为对照组。得到的蛋白复合物直接酶解后 进行高效液相色谱- 串级质谱(HPLC-MS/MS)分析, 通过相应的肽段序列标签在Swiss Prot 数据库 中搜索蛋白质。结果: 通过数据库搜索首次鉴定了5 个与生殖相关的且与Cx31.1 可能发生相互作 用的蛋白, 分别是HSPB1 、HSPA2 、HSPA5 、BYP2 和XAGE1A 。其中HSPB1 、HSPA2 和HSPA5 属于热休克蛋白家族, BYP2和XAGE1A 蛋白在睾丸组织中特异表达。结论: Cx31.1可能与生殖相 关蛋白具有相互作用。 关键词: 间隙连接蛋白31.1(Cx31.1); 免疫共沉淀; 高效液相色谱- 串级质谱(HPLC-MS/MS); 热休克蛋白 中图分类号: Q291 文献标识码: A 文章编号: 0253-357X(2013)07-0433-05 -433- 第 33 卷第 7 期Vol.33, No.7 生 殖 与 避 孕 doi: 10.7669/j.issn.0253-357X.2013.07.0433 2013 年7 月Jul. 2013 Reproduction Contraception E-mail: randc_journal@163.com Protein Interaction between Connexin 31.1 and Proteins Related to Reproduction Zhen-chao RUAN1 1 1 , Xing-li ZHU , Kai-li ZHU , Yuan-chun LI2, Yan HUANG1 (1. State Key Laboratory of Genetic Engineering, Institute of Genetics, School of Life Sciences, Fudan University, Shanghai, 200433) (2. National Population and Family Planning Key Laboratory of Contraceptives Drugs Devices, Shanghai Institute of Planned