重组人早孕因子的表达与纯化.pdf

下载文档

4
0
约1.88万字
约 5页
2018-05-08 发布于福建
举报
版权申诉
保障服务

重组人早孕因子的表达与纯化.pdf

1、本文档共5页，可阅读全部内容。
2、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。
3、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击这里二次下载。
4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。

中国农学通报 2011,27(14):40-44 Chinese Agricultural Science Bulletin 重组人早孕因子的表达与纯化 1 1,2 2 2 1 1 2 1 杜晓明，张改平，王丽，郭军庆，王林林，冯华，权凯，王爱萍 1 ( 郑州大学生物工程系，郑州450001 ； 2 河南省农业科学院，农业部动物免疫学重点开放实验室，河南省动物免疫学重点实验室，郑州450002) 摘要：早孕因子（EPF ）是具有免疫抑制和生长调节活性的妊娠相关蛋白，为目前最早确认妊娠的生化指标之一。为获得人早孕因子重组蛋白，通过PCR 技术扩增人早孕因子基因，克隆入原核表达载体 pGEX-6p- 1，与GST 基因相融合，构建重组表达质粒，转化大肠杆菌表达菌株BL21 ，经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG ）诱导表达，以SDS和Western blot 分析重组蛋白的表达，通过GST 树脂纯化表达蛋白。结果成功构建重组表达质粒pGEX6P-EPF ，在大肠杆菌中诱导表达了GST- EPF 融合蛋白，表达蛋白分子量为37.3 kDa ，并能被抗GST 单克隆抗体特异识别，GST 亲和层析纯化，制备了EPF 重组蛋白。关键词：早孕因子；原核表达；重组蛋白中图分类号：R714.1 文献标志码：A 论文编号：2011-0138 ProkaryoticExpressionandPurificationofEarlyPregnancyFactorProtein 1 1,2 2 2 DuXiaoming,ZhangGaiping ,WangLi,GuoJunqing, WangLinlin,FengHua,QuanKai,WangAiping1 1 2 1 1 (Department of Bioengineering, Zhengzhou University,Zhengzhou450001； 2Key Laboratory of Animal Immunology of the Ministry of Agriculture, Henan Provincial Key Laboratory of Animal Immunology, Henan Academy of Agricultural Sciences,Zhengzhou450002) Abstract: Earlypregnancyfactor(EPF)isapregnancy-associatedproteinthathasimmune-suppressiveand growth-regulatoryactivities.Itisregardedasabiochemicalindexbywhichsuper-earlypregnancycanbe determined.TheobjectiveofthestudywastoexpresstherecombinantEPFproteininEscherichiacoli(E.coli). TheEPF geneamplifiedbyPCRwassub-clonedintoapGEX-6P-1vectorfusedwithGST genetoconstructa recombinantplasm