人肠三叶因子真核载体的构建与表达-南方医科大学学报.pdfVIP

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2018-08-19 发布于天津
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人肠三叶因子真核载体的构建与表达-南方医科大学学报

南方医科大学学报 · 1630 · (JSouthMedUniv)2008;28(9) 人肠三叶因子真核载体的构建与表达卢雅丕，周飞，王琳，张波，董菁，任建林（厦门大学附属中山医院消化内科，福建厦门） 361004 构建人肠三叶因子的真核载体并在真核细胞中表达从人结肠粘膜提取总逆转录摘要：目的 (hITF/hTFF3) 。方法 RNA ，多聚酶反应制备总扩增基因克隆至载体中测序鉴定后将基因重组到真核表，，， cDNA PCR hTFF3 TA pGEMT hTFF3 达载体中，转染真核细胞，裂解细胞后分别采用鼠抗人抗体和鼠抗人抗体行 pCMV5-myc 293-T c-myc TFF3 Western-blot 了解表达情况从人结肠粘膜成功克隆了基因并经测序验证构建了真核表 hTFF3 。结果 hTFF3 ， pCMV5-myc-hTFF3 达载体转染细胞后行提示可在细胞中表达成功构建重组真核， western-blot hTFF3 293-T 。结论 pCMV5-myc-hTFF3 载体并在细胞中表达蛋白，为进一步研究的功能、作用机制及相互作用蛋白奠定了基础。 293-T hTFF3 hTFF3 关键词人肠三叶因子基因重组真核表达载体：；；中图分类号：文献标识码：文章编号：（） R735 A 1673-4254 2008 09-1630-04 Construction of a recombinant eukaryotic vector of human intestinal trefoil factor and its expression in 293-T cells LUYa-pi,ZHOUFei,WANGLin,ZHANGBo,DONGJing,RENJian-lin DepartmentofGastroenterology,ZhongshanHospital,XiamenUniversity,Xiamen361004,China Abstract: Objective Toclonehumanin