泥鳅对创伤急性反应的功能蛋白质组学研究.pdfVIP

摘要 f研究背景：几乎所有动物受到创伤和感染等外界伤害时都会启动急性反应系统(acute phaseresponse，ARP)进行快速的自我保护，包括抵御微生物的入侵，促进创伤的修复，帮助 机体恢复正常静息状态等，其中涉及众多蛋白质(APP)水平的变化。APR的研究在哺乳动物中有 较多的报道，研究成果多涉及人类医疗领域。低等生物在更大程度上倚赖APR的保护作用，例如 鱼类就是一种很好的APR研究模型。蛋白质组学的发展为APR的研究带来了快速，高灵敏度，高分 辨率，高通量的研究方法，其从整体的角度研究APR体系并可以快速鉴定候选APP的能力是其它方 法所不具备的。)夕厂 研究目的：研究泥鳅创伤后血清和皮肤蛋白质组的变化情况，鉴定APR候选蛋白，寻找其中 具有特殊研究价值的活性蛋白，进行功能上的鉴定。 ／研究方法：采用双向电泳技术获取泥鳅创伤前后血清和皮肤的小分子蛋白图谱，利用基质 laser timeof 辅助激光解析飞行时间检测质谱分析(matrix—assisteddesorption—ionization mass flight of ionization mass 交换层析获取初步纯化产物并采用鸡胚绒毛尿囊膜模型检测其功能。 研究结果：建立了血清和皮肤小分子双向电泳参考图谱，以此为基础鉴定了创伤前后发生 并通过ESl-MS．／MS获得其中9个蛋白的部分氨基酸序列。数据库搜索鉴定了其中的22个蛋白质，结 果发现3个血清蛋白和5个皮肤蛋白为已知的APR蛋白。其它13个蛋白部分根据已知的功能可以推 断它们在APR中的作用或者表达发生变化的原因，部分蛋白的变化原因尚无法推测。对 囊膜血管生长的促进作用。3户—‘一7 ／一 结论：蛋白质组学为APR领域带来高效率高通量的研究方法，改变了传统的ELISA方法需要 subtractive 事先确定靶蛋白的低效的，而且难以发现新蛋白的状况，也克服了suppression zaition(SSH)技术固有的假阳性，实现了对APP候选蛋白快速的鉴定。 hybridi 关键词：AP鼢 i遗够反幺 Abstract nna[o the withitsfirstlineel Background：l body protcotion immunitysyslemprovide nstexternuli andsucha mechanismcanalmosthefound rigai njury rapid．non—specifiC secreted “jI liVi cellsand meIecuIesofinnate ng immunity lhroughthekingdom．Both to andthe I are in theirreadiheSSstatus el‘ceIactivation regard process dynamiC