第3章 病毒和亚病毒-1.pptVIP

成熟的病毒粒子从被感染细胞内转移到外界的过程。 没有包膜的病毒合成溶解细胞的酶，引起内裂解。 有包膜的病毒以下图方式进行： 5 、裂解（释放） 最后:大肠杆菌死亡并破裂，释放出里面的病毒，新一代病毒开始新的生命旅程 ??????????????????????????????????????????????????????????????????????????? （1）噬菌斑：在涂布有敏感宿主细胞的固体培养基表面，若接种上相应噬菌体的稀释液，其中每一噬菌体粒子由于先侵染和裂解一个细胞，然后以此为中心，再反复侵染和裂解周围大量的细胞，结果就会在菌苔上形成一个具有一定形状、大小、边缘和透明度的噬菌斑。 （2）效价：这一名词在不同的场合有不同的涵义。在这里，效价表示每毫升试样中所含有的具侵染性的噬菌体粒子数。又称噬菌斑形成单位数或感染中心数。 2. 噬菌体效价的测定 （p75） （3）双层平板法： 底层平板（约2%琼脂培养基7-8ml） 37℃ 上层培养基（约1%琼脂培养基3ml） 10余h计数 上层平板 宿主菌悬液（对数期菌液0.2 ml） 混匀 噬菌体试样（合适稀释液0.1 ml） 用双层平板法计算出来的噬菌体效价总是比电镜直接计数得到的效价低。 成斑率：同一样品根据噬菌斑计算出来的效价与用电镜计算出来的效价之比，称成斑率。 双层平板法 琼脂平板 菌液+噬菌体试样+琼脂培养基 培养10天 计数噬菌斑 噬菌斑数=试样中噬菌体数 噬菌体增殖规律的描述方法 离 心 术 抗病毒血清 培养 定时取样测噬菌斑数 一步生长曲线 3.一步生长曲线 （p76） 定量描述 烈性噬菌体 生长的三个重要特性参数 先将噬菌体与敏感的细菌混合发生吸附，未吸附的噬菌体以离心法或加抗血清除去；然后定时取样接种在有可裂解的敏感性细菌的平板上，经培养，以时间为横坐标，噬菌斑数为纵坐标绘图得到的曲线。 2、三个时期 1、定义 裂解期——噬菌斑数突然直线上升，新噬菌体大量释出， 直至所有感染细胞全部裂解 潜伏期——从噬菌体吸附到细菌表面至出现新的噬菌体的 最短时间（4个阶段：吸附、侵入、复制、组装） 裂解量——每一宿主细胞产生平均子代噬菌体粒子的数量。 裂解量=裂解期的噬菌斑数/潜伏期的噬菌斑数（细菌数） 例：裂解量=2100/100=210噬菌斑粒子数/细菌 稳定期——完全裂解后，噬菌斑数又趋稳定，曲线变平坦， 称稳定期。 4. 溶源性 温和性噬菌体定义 整合到染色体上的噬菌体DNA叫原（前）噬菌体 含原噬菌体的细菌称为溶源性细菌。 温和噬菌体基因组形成原噬菌体的过程称为溶源化 凡吸附侵入菌体后，不立即裂解细菌细胞，而是将其核酸整合到寄主染色体上，进行同步复制，随细胞分裂传递给子代，并赋予菌细胞以新的性状。 溶源菌 细菌的溶源性具有遗传性 溶源菌对同源噬菌体具有免疫性 溶源性细菌在培养中不易被查觉 非溶源细胞 自发裂解和诱导裂解：有少数噬菌体可自发或 诱发裂解宿主细胞变成烈性噬菌体 溶源性细胞可获得一些新的生理特性 复愈:溶源菌 失去前噬菌体 白喉杆菌 白喉毒素 β－噬菌体 宿主发病 ①复制（细菌的核酸和噬菌体的核酸同步复制） ②可自发裂解（即少数溶源性细菌中温和性噬菌体变成了烈性噬菌体），几率10-6-10-8； ③诱发裂解；几率10-3-10-5 ④免疫性（immunity）含有温和噬菌体的细菌可抵御外来噬菌体的侵染 ⑤复愈性，溶源菌在其增殖过程中10-5个细菌丧失前噬菌体，成为非溶源性细菌。 溶源菌的特性： （补充）温和噬菌体存在的形式 游离态：成熟后被释放并有侵染性的游离噬菌体粒子。 整合态：已整合到寄主基因组上的前噬菌体状态。 营养态：前噬菌体经外界理化因子诱导后，脱离宿主核基因而复制、合成和装配状态。 Lytic and Lysogenic cycle of Temperate Phage 八、非增殖性感染 增殖性感染（productive infection） ：病毒侵入寄主（敏感）细胞，该细胞允许病毒增殖的为增殖性感染。 非增殖性感染（non productive infection）：病毒侵入寄主（敏感）细胞，由于该细胞或病毒的原因，病毒增殖受阻不能增殖的为非增殖性感染。 主要方式和原因： 1、流产感染（abortive infection） ：病毒侵入寄主（敏感）细胞后，只能表达部分基因，不能完成病毒增殖的感染方式。