胶质瘤细胞组蛋白去甲基化酶JMJD3表达降低.pdfVIP

细胞与分子免疫学杂志(ChinJCellMolImmuno1)2014，30(5 525 · 论著 · 文章编号：1007—8738(2014)05—0525—02 胶质瘤细胞组蛋 白去 甲基化酶 D3表达降低 李彦伟，王 哲 (第四军医大学病理学与病理生理学教研室，陕西西安710032) [摘 要] 目的 检测和分析组蛋白去甲基化酶含十字形结构域蛋白3(JMJD3)在胶质瘤及瘤旁脑组织中的表达。方法 用组 织芯片筛选出JMJD3表达阳性的胶质瘤组织 ，选取50例相关胶质瘤患者的石蜡标本，采用免疫组化 sP法检测JMJD3在相关 胶质瘤组织中的表达与定位以及与瘤旁组织中表达的差异，分析JMJD3与胶质瘤的相关性。结果 通过组织芯片筛选，发现 JMJD3在正常少突胶质细胞中有表达。在5O例胶质瘤患者的石蜡标本中，15例标本肿瘤组织为阳性，35例瘤旁组织为阳性。 结论 与瘤旁脑组织相 比，胶质瘤JMJD3的表达降低。 [关键词]胶质瘤；JMJD3；组蛋白去甲基化 [中图分类号]R739．41，R392-33 [文献标志码]A 组蛋白作为组成染色体的基本结构之一，它不 京医院伦理学委员会批准，并获患者知情同意。 仅仅是DNA的一种支持物，在基因的表达调节以及 1．1．2 主要试剂 小鼠抗人 JMJD3抗体购 自Abnova公司； 基因印记等多方面起重要作用。组蛋 白有多种翻译 组织芯片购 自西安艾丽娜生物科技有限公司的人类多器官肿 瘤及正常组织组合芯片(共 2张)：FDA808a-1、FDA808a-2。 后修饰，包括乙酰化、泛素化、甲基化等，大大丰富 DAB试剂盒购 自福建迈新生物科技有限公司，免疫组化试剂 了组蛋白的结构及功能，成为表观遗传学上的研究 盒购自北京中杉金桥生物技术有限公司。 热点之一_1J。其中，对于组蛋白的甲基化的研究是 1．2 方法 目前的一大重要研究方向。目前很多研究发现组蛋 1．2．1 组织芯片筛选法 采用免疫组化SP法处理组织芯片 白发生甲基化与肿瘤的发生和发展之间可能存在着 以检测JMJD3蛋白在正常组织中的表达以及在肿瘤组织 中的 密切的联系。含十字形结构域蛋 白3(jumonjidomain— 表达。将组织芯片脱蜡至水，抗原修复(pH9．0的Tris-EDTA containingprotein3，JMJD3)是H3K27me2／me3的组 煮沸20rain)；用新鲜配置的30mL／L过氧化氢-甲醇溶液灭 蛋白去甲基化酶，被认为与神经以及表皮细胞的发 活内源性过氧化氢酶 ，50g／L牛血清 白蛋 白(bovineserum 育和免疫密切相关 一’J，与染色质的转录和激活也 albumin，BSA)封闭；滴加鼠抗人 JMJD3抗体 (1：25)后4℃过 有着重要的相关性。目前针对JMJD3与肿瘤相关性 夜。最后滴加山羊抗小鼠二抗 (1：10)，用二氨基联苯胺 (3， 3diaminobenzidine，DAB)显色并用苏木精进行复染。芯片中 的研究报道较少。本研究采用组织芯片筛选出合适 单独的一点作为阳性对照。采用双盲法观察 JMJD3表现为细 的组织类型进行研究，并用免疫组化链霉亲和素一过 胞核阳性。 氧化物酶交联法 (streptavidinperoxidaseconjugated 1．2．2 组织芯片规格 组织芯片为多器官正常组织组合微 method，SP法)检测 50例相关类型胶质瘤组织中 阵列芯片，含 24种正常人体器官(大脑、小脑、肾上腺、卵 JMJD3的表达，分析JMJD3与胶质瘤的相关性，为进 巢、胰腺、甲状旁腺、垂体、睾丸、甲状腺、乳腺、脾脏、扁桃 一 步揭示JMJ