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第一章　蛋白质化学 第一节　概述 一、蛋白质的生物学功能 1.催化功能 2.调节功能 3. 运动功能 4. 运输和跨膜转运功能 5. 保护和防御功能 6. 信息传递与识别功能 7. 贮存功能 8. 结构功能 二、蛋白质的元素组成 三、蛋白质的水解 1.酸水解 特点：⑴酸水解不引起氨基酸的消旋， 缺点:但Trp完全被破坏，Ser和Thr部分破坏，Asn和Gln的酰胺基被水解 2.碱水解 特点：⑴碱水解使氨基酸消旋，许多氨基酸被破坏，⑵但色氨酸不被破坏。Arg可脱氨生成鸟氨酸及尿素。常用于测定色氨酸含量 3.酶水解 酶水解既不破坏氨基酸，也不引起消旋。但酶水解时间长，反应不完全 第二节：氨基酸 一、氨基酸的结构与分类 二、氨基酸的性质 （一）基本结构：L－α－氨基酸 （二）氨基酸的分类 1.常见的蛋白质氨基酸 2.不常见蛋白质氨基酸 3.非蛋白质氨基酸 加各种氨基酸的功能 二、氨基酸的性质 中性氨基酸： PI＝ 1.α-氨基参加的反应 2.α-羧基参加的反应： 3. 侧链参加的反应 4.α-氨基与α-羧基共同参加的反应 分离过程： 这些衍生物是无色的，酸性条件下极稳定，可溶于乙酸乙酯，经高压液相即可分析出其N端的氨基酸组成。 　酸水解生成的DNS－氨基酸（具有荧光），用乙酸乙酯抽提，可得到DNS－氨基酸，用色谱法分析之，亦可不用分离，直接用纸电泳或薄层层析法鉴定 (6)与荧光胺反应 Tyr的酚基还可以与重氮化合物结合生成桔黄色化合物(Pauly反应)。His的咪唑基亦可发生相似的反应，生成棕红色化合物。 Arg的侧链胍基在硼酸缓冲液(PH8 ～ 9 25 ～ 35 ℃)与1,2环已二酮反应生成缩合物，但此反应可逆 Cys 在体内多生成胱氨酸，形成二硫键 Cys侧链上的SH，反应性能高，在微碱条件下可解离成硫醇阴离子，(-CH2-S-)能与卤化烷剂如碘乙酸、碘乙酸胺、甲基碘等反应生成稳定的烷基衍生物 可与二硫硝基苯甲酸(dithionitrobenzoic acid DTNB)或Ellman试剂发生硫醇-二硫化物交换反应 胱氨酸中的二硫键在稳定蛋白质的构象上起很大的作用，氧化剂和还原剂都可以打开二硫键 (3) 与2,4-二硝基氟苯 （2,4-DNFB）的反应（Sanger反应）： DNP-氨基酸为黄色，它溶于乙酸乙酯；可用之抽提并与标准的DNP-氨基酸作比较。 　 ε-NH3、酚羟基也可以有此反应，但反应慢，且生成的DNP-氨基酸不溶于乙酸乙酯，而是保留在水相里。 (4) 与苯异硫氰酸酯（PITC）反应（Edman反应）： 生成的肽链比原来少一个氨基酸，可以进行下一轮反应，而不需要彻底水解掉 ，此法是自动氨基酸分析仪的基本原理 (5) 与丹磺酰氯（DNS-Cl）的反应： 1ng即可测出。 激发波长：390nm，发射波长475nm 可以用荧光分光光度计进行定量检测 (7) 形成Schiff碱　 2.由α-羧基参加的反应： (1)与碱反应成盐 (2)与醇反应成酯 (3)与酰化试剂反应成酰氯 (4)脱羧基生成胺 （1）成盐反应 R—CH—COOH + HCl NH2 R—CH—COOH NH2·HCl （2）成酯反应 R—CH—COOH + C2H5OH NH2 R—CH—COOC2H5 NH2 HCl气 （3）酰氯化反应 Y—NH—CRH—COOH + PCl5 酰化氨基酸 Y—NH—CRH—COCl 酰化氨基酰氯 使氨基酸的羧基活化，易于另一氨基酸的氨基结合，在合成肽的工作上常用。 （4）脱羧反应 H2N—CHR—COOH 脱羧酶 CO2 + RCH2NH2 胺 试 剂 颜色 反应有关基团 有此反应的氨基酸 米伦反应 HgNO3Hg(NO3)2及HNO3混合物 红色 ? Tyr 黄色反应 浓HNO3及NH3 黄色、橘色 ? Tyr、Phe 乙醛酸反应 (Hopking-Cole反应) 乙醛酸试剂及浓H2SO4 紫色 ? Trp 坂口反应 (Sakaguchi反应) α-萘酚、NaClO 红色 胍基 Arg 酚试剂反应 (Folin-Cioculteu反应) 碱性CuSO4及磷钨酸-钼酸 蓝色 酚基、吲哚基 Tyr Ellman反应 二硫硝基苯甲酸 DTNB 紫色 巯基 Cys 3.蛋白质侧链的反应 —OH N 反应名称 侧链反应： Tyr的酚基在3，5位易发生亲电取代反应 * 第一节：概论 第二节：氨基酸 第三节：蛋白质一级结构及测序 第四节：蛋白质空间结构 第五节：蛋白质结构与功能的关系 第六节：蛋白质的性质 第七节：蛋白质的分离与纯