推荐022糖与苷演示文稿.pptVIP

2、分子量测定 单糖、低聚糖及其苷的分子量测定 多糖的分子量测定 3、单糖的鉴定 4、单糖间、糖与苷元间连接位置的确定 确定苷键的连接位置，目前主要是应用13C-NMR中的苷化位移法。 水解前后 △δ： C2 29.7 32.0 -2.3 C3 77.0 70.9 +6.1 C4 34.3 38.4 -4.1 因成苷引起的化学位移变化，专业上称之为苷化位移（glycosidation shift）。 五、糖链连接顺序的确定 1、经典方法 缓和水解 酶解 乙酰解 2、 MS法测定糖链连接顺序 技术→FDMS、FABMS等。 优点→不必制备衍生物,用量小,准确,简便。 3、NMR法测定糖链连接顺序 是将糖及其苷类衍生物全乙酰化后，测定观察两糖之间质子的远程偶合或NOE效应，以期确定糖的连接顺序。 4、苷键构型的确定： 经典方法 酶水解法 Klyne法 NMR法 第七节 糖和苷的提取与分离 Extraction and Isolation of Saccharides and Glycosides 如同其他天然药物化学成分提取分离一样，糖和苷类的提取分离也必须首先全面分析所研究的天然药物中糖和苷类成分的性质及共存成分的情况，方能设计合理的方案，但要对类型繁多、结构复杂、性质差异明显的糖及其苷类提出共同的基本提取分离方案，实属难事。但以下问题则是提取分离糖及其苷类成分时必须考虑的共同点。 一、提取分离糖及苷时须考虑的问题 酶对糖及其苷类提取的影响 欲提取原始苷时，需杀酶，60%以上乙醇、甲醇或80℃以上水处理； 欲提取次生苷或苷元，需利用酶，如发酵等。 二、提取糖及苷类溶剂的选择 三、杂质的除去 四、分离 1、分级沉淀法 2、活性碳柱层析 3、凝胶层析法 4、离子交换纤维素层析法 5、蛋白质去除法 二、氧化反应： 糖分子中的醛酮基、醇羟基，易进一步氧化，然而，天然药物中的糖多与非糖物质形成苷，故有应用意义的主要是醇羟基的氧化，尤其是选择性作用于邻二羟基的氧化反应将有助于糖的立体结构推断。 过碘酸氧化反应：是缓和而选择性极高的糖的邻二羟基氧化反应，尤其是开裂1，2-二元醇的反应几乎是定量进行的。 ▲过碘酸氧化反应的速度： 反应速度顺式大于反式，这是由其反应机理决定的。 可见顺式五元环状酯中间体的形成，同时该反应速度也受介质PH的影响。 过碘酸反应的终产物甲醛、甲酸均较稳定，可被定量测定，用以推测糖的结构。 三、糠醛形成反应，即酚醛缩合反应,也叫Molish反应 是糖的检识反应，也是苷类的检识反应。特征是：糖或苷类遇浓硫酸/α-萘酚试剂将呈紫色环于界面上。 反应机理是：在浓硫酸作用下，苷分子中糖内部脱水成糠醛衍生物，再与酚类试剂缩合形成有色物。即 紫红色 α-萘酚 四、羟基反应：糖的羟基反应，尤其在苷类化合物的分离、结构鉴定及衍生物制备中扮演着较为重要的角色，主要反应包括醚化、酯化、甚至缩醛缩酮化。其中又以酰化反应较为重要。 ?从糖的结构看，活性最高的是半缩醛羟基，但该羟基在苷类化合物中多已被苷化；其次是伯醇基；仲醇基更次，仲醇基中又以C2-OH较活泼，这是因为C2-OH受C1的诱导效应致其酸性较强所致。 1、醚化反应： 苷类的分离及结构鉴定中糖的醚化反应常用的为甲醚化， 所用试剂多为(CH3)2SO4/con.NaOH；CH3I，AgO等。 2、酰化反应： 在苷类化合物的分离和结构鉴定中，为了降低其亲水性、判断糖与糖、糖与苷元连接位置的需要，往往对苷类化合物中糖上羟基进行醚化外，酰化反应也是制备衍生物中常用的方法之一。其中以乙酰化衍生物较为常见。 常用的酰化试剂有： 醋酐/吡碇；Ac2O/NaAc；Ac2O/ZnCl等。 其糖分子上羟基酰化难易与醚化反应相同，即半缩醛羟基活性最高、末端伯醇基次之、仲醇基活性较低，仲醇基中又以C2-OH较易，C3-OH最难。 3、硼酸络合反应： 苷类化合物中糖上的邻二羟基可与硼酸生成硼酸络合物，用以糖的分离、鉴定乃至构型推定。一般说来，呋喃糖苷的络合能力最强，吡喃糖苷络合能力最弱。 产物呈酸性，可酸碱滴定、离子交换、电泳。 4、缩酮和缩醛化反应： 苷类化合物的结构研究，尤其是衍生物制备时，为了使部分羟基不被诸如甲醚化、酰化，常常用缩酮或缩醛反应予以保护。 酮类试剂易与顺式邻二羟基生成五元环状物； 醛类试剂则易与1，