大蒜总黄酮提取及纯化研究-答辩稿.pptVIP

大蒜总黄酮提取及纯化研究 目 录 一、研究目的与意义 二、国内外研究现状 三、研究的主要内容 四、实验结论 五、致谢 一、研究目的及意义 大蒜在我国资源丰富，但国内大蒜加工产业链过于简单，大蒜出口更多集中在初中级产品上，多以鲜蒜销售为主，深加工产品非常少，因此经济效益也相对较低。 大蒜中的功效成分为大蒜素、黄酮类化合物等。大蒜具有强力杀菌、预防肿瘤和癌症、降血压、降胆固醇、降血脂、抗衰老、抗疲劳、抗血栓形成、预防糖尿病、保护心血管等功能。 研究表明，大蒜中含有黄酮类化合物，在中国知网中有6篇关于大蒜黄酮提取的文章,其中张泽英采用乙醇回流提取法提取大蒜总黄酮得率0.97%。而本实验采用超声波辅助乙醇提取法提取大蒜中黄酮的得率为1.24%。其得率有所提高，所以具有一定的研究意义。 本实验对提取的粗黄酮进行纯化，得到的大蒜黄酮与研究比较多的大蒜素相比没有刺激性气味，将来可以作为功能性食品的基础原料。所以说大蒜黄酮的研究前景较大。 二、国内外研究现状 大蒜这一被世界许多国家视为珍品的物产，在我国却一直未能被真正形成产业开发。在我国大蒜主要以提取大蒜素为主要研究对象，而大蒜素（三硫二丙烯）可以通过化学合成得到。 国外对大蒜的研究也给予了高度的重视，从药理、临床、应用等各个领域进行了比较深入系统的研究，进一步证明了大蒜不仅是一种优良的保健食品，而且是一种具有广泛用途的天然药品。 三、研究的主要内容 3.1 大蒜总黄酮提取工艺的确定 3.2 大蒜总黄酮的纯化工艺研究 3.3 大蒜纯化样品的紫外光谱和 红外光谱分析 3.4 精制大蒜黄酮的活性研究 3.1 大蒜总黄酮提取工艺的确定 3.1.1大蒜总黄酮提取方法的选择 超声波辅助乙醇提取法，其得率最高，所以本实验采取超声波辅助乙醇提取法。 3.1.2 大蒜总黄酮的提取工艺流程 3.1.3 芦丁标准曲线的绘制 标准曲线的回归方程为：Y=10.325X＋0.0100，R2=0.9995，表明了芦丁在浓度0-0.05mg/ml之内线性关系最好。 图3-1 芦丁标准曲线 3.1.4 单因素实验 图3-2 超声波作用时间对提取效果的影响 图3-3 不同料液比对提取效果的影响 图3-4 提取时间对提取效果的影响 图3-5 乙醇浓度对总黄酮得率的影响 通过单因素试验确定了超声波辅助乙醇回流提取法的最佳条件：超声波处理20min，料液比1:19，提取时间2h，乙醇体积分数85%，提取温度70℃。 3.1.5 响应面实验结果分析 表3-2 响应面因素水平表 水平 因 素 料液比 乙醇浓度（%） 温度（℃） -1 1:16 80 65 0 1:18 85 70 1 1:20 90 75 3.1.6 响应面实验结果分析 表3-3 响应面试验测定结果分析表 3.1.7 各因素之间的响应面图 图3-7 提取温度与料液比的相互作用的影响 图3-9 提取温度与乙醇浓度的相互作用的影响 图3-8 乙醇浓度与料液比的相互作用的影响 各个因素经回归拟合后，选择对响应值显著的各项可以得到大蒜总黄酮得率度编码自变量（提取温度、提取时间、液料比）的二次多项回归方程为： Y =+0.22-4.750E-003* A+0.014* B+3.750E-003* C-3.500E-003* A * B +1.000E-003* B * C-0.071* A2-0.073* B2-0.073* C2 以上三个响应面立体图直观地给出了各个因子交互作用后对总黄酮得率的影响的直观图。在所选的范围内存在极值，既是响应面的最高点，同时也是等值线最小椭圆的中心点。提取温度、乙醇浓度及料液比对大蒜总黄酮的提取效果都是有影响的，提取温度与提取时间的交互作用影响较大，在响应曲面图中表现为曲面坡度大，变化较明显。 3.1.8 响应面优化 响应面分析表明，最佳提取工艺理论值：提取温度66.68℃，料液比1:18.98，乙醇浓度81.94%。 考虑到实际操作的便利，将最佳工艺条件修正为：提取温度67℃，料液比为1:19，乙醇浓度80%。 试验验证：在此条件下重复5次进行验证试验，大蒜总黄酮得率可由1.26%上升到1.32%。 3.2 大蒜总黄酮的纯化工艺研究 图3-10 大蒜黄酮的纯化样品及实验装置 3.2.1 大孔吸附树脂的选择结果分析 由表3-4得效果最佳的是AB-8树脂，所以试验选用AB-8树脂对大蒜总黄酮进行纯化。 3.2.2 乙醇浓度对解析效果的影响 由图3-11可看出，吸附饱和的