环介导等温扩增技术(LAMP)检测人星状病毒方法的建立和其在再生水检测中的应用.pdf

2011年第6卷 生 态 毒 理 学 报 V01．6，2011 第6期，600-606 Asian No．6，600-606 Journalof Ecotoxicology 建立及其在再生水检测中的应用 杨丽1邡，何晓青1’，韦玉梅比，朱轶1，程莉u，王子健2，黄文34 1．北京林业大学生物科学与技术学院，北京100083 2．中国科学院生态环境研究中心环境水质学国家重点实验室，北京100085 3．华中农业大学食品科技学院，湖北武汉430070 isothermal 摘要：为快速高效地检测人星状病毒，建立了一种新的试验方法——环介导等温扩增技术(100p·mediatedamplification technology，LAMP)，并对人星状病毒LAMP反应条件进行了优化。结果表明，镁离子终浓度为4mmol·L‘。、甜菜碱终浓度为1 mol·L“的25“L体系下65。C反应90mha为其最佳反应条件。对扩增终产物进一步进行酶切分析得到的条带大小与预期的 结果(84和135bp)吻合，以人星状病毒、轮状病毒及诺如病毒为模板进行特异性测试亦没有发生交叉反应。将人星状病毒质 copies· p,L“和50．4 高的检测手段，在人星状病毒的快速检测方面具有一定的开发潜力。 关键词：人星状病毒；环介导等温扩增技术(LAMP)；HNB；焦磷酸镁；再生水 文章编号：1673—5897(2011)6-600—07中图分类号：x171．5文献标识码：A Isothermal DetectionofHu- Loop—Mediated man andIts in Water Astrovirus Reclaimed Application Wen3’+ YangLil■HeXiaoqin91’，WeiYumeim，ZhuYil，ChengLi他，Wangz萄iaIl2，Huang and 1．Schoolof Sciences Biological Technology，aeijingForestryUniversity，Beijing100083，Ch曲 2．State ofEnvkonmental CenterforEco-Environmental ofSci- Laboratory AquaticChcmistry，Research Sciences，ChineseAcademy Key 100085，China ences，Beijing 3．Schoolof Scienceand Food Technology，HuazhongAgriculturalUniversity，Wuhan430070，China Received 13 2011 3 2011 February acceptedMay Abstract：A isothermal was for humanas- developed loop·mediatedamplification(LAMP)techno