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二氢卟吩e4的光敏特性研究 ——以叶绿素做对比 肖君萍，黄庆娜，刘颖玉，刘洋，麦嘉韵 摘要：研究了我国特有的廉价蚕沙叶绿素的光敏特性及其降解产物之一的二氢卟吩e4的光敏特性，分别测定不同pH值、温度、浓度、光源、光照时间对其光敏性质的影响，通过实验现象的对比，分析光敏剂对杀伤肿瘤细胞活性与光敏性的关系，针对国内外尚无明确报道的二氢卟吩e4的光敏性及光漂白特性进行了分析讨论.为恶性肿瘤的临床治疗和诊断提供了科学依据. 关键词：二氢卟吩e4；光谱；光敏性；光漂白 叶绿素的光敏特性研究 蚕沙(家蚕粪) 是蚕业的主要副产物之一。在我国, 每年约有一百万吨的蚕粪干物可供利用, 其中, 叶绿素含量占蚕粪干物的1 %左右, 是一种丰富廉价的叶绿素资源。已知蚕沙中占叶绿素总量75 % 以上的是叶绿素a .[1]尽管叶绿素a 本身对光、热、酸、碱、酶等理化因素极不稳定而不适合直接应用于医药上，但由于它廉价易得所以适合用于实验研究。 本实验采用紫外检测方法研究叶绿素的光谱特性和光漂白特性. 1.1仪器、药品及试剂 主要试剂： 叶绿素（1 mg/ml，0.4mg/ml，0.3 mg/ml，0.2 mg/ml，0.1 mg/ml，0.05 mg/ml），0.5mol/LNaOH溶液，0.5mol/L HCl溶液(实验所需的药品预先配制好，配好的药品盛装在棕色细颈玻璃瓶中, 避光低温保存在冰箱冷藏室) 主要仪器： SHIMADZU 生产的UV 1700 spectrophotometer (UV 1700 岛津分光光度计)、紫外灯、红光灯、黄光灯、绿光灯、蓝光灯、白光灯、罩灯的纸箱、插座、移液枪、石英比色皿、蒸馏水、擦镜纸、烧杯、4ml一次性试管（8支）、标签纸、容量瓶、黑色塑料袋、计时器 实验方法 1.2.1 待测叶绿素溶液的配制 （1）1.0mg/ml叶绿素溶液 称取25mg 叶绿素，用去离子水完全溶解，再定容至25ml； （2）0.8mg/ml叶绿素溶液 移取8ml（1）号溶液，用去离子水定容至10ml； （3）0.4mg/ml叶绿素溶液 移取10ml（1）号溶液，用去离子水定容至25ml； （4）0.3mg/ml叶绿素溶液： 移取3ml（1）号溶液，用去离子水定容至10ml； （5）0.2mg/ml叶绿素溶液 移取2ml（1）号溶液，用去离子水定容至10ml； （6）0.1mg/ml叶绿素溶液 移取1.0ml（1）号溶液，用去离子水定容至10ml； （7）0.05mg/ml叶绿素溶液 移取0.5ml（1）号溶液，用去离子水定容至10ml. 1.2.2 光照实验 选取0.4mg/ml，0.3 mg/ml，0.2 mg/ml，0.1 mg/ml，0.05 mg/ml 叶绿素溶液，在测量溶液0分钟光照时的紫外吸收光谱，先找出最高吸收峰值对应的吸收波长，根据光敏剂的光源选择原理，选取了符合波长的光源作为激发光源.在激发光源一致的条件下，再进行不同光敏物质的分组照射及紫外吸收光谱检测.在不同浓度的叶绿素溶液进行紫外检测（450~700nm），得出扫描图谱. 图1-1 不同浓度叶绿素的紫外吸收光谱图 由图1-1可见，样品在502nm（S带）和656nm（Q带）处有两个特征吸收峰，在656nm处叶绿素有一个强吸收峰，在502nm处有一个弱吸收峰，在502nm处的吸收峰强度较弱，浓度较低时峰形不明显，而656nm处吸收峰强度较大，分布均匀，有利于比较.因此选定656nm为叶绿素的检测波长. 随着溶液浓度的增大，叶绿素在可见光区的吸收也增大，但是吸收带的形状没有发生变化.不管是在高浓度还是在低浓度下，除了吸收强度有所变化外，吸收峰的相对大小和位置没有变化，也没有出现新的吸收带.说明在不同浓度溶液中叶绿素均以单体形式存在. 1.2.3 浓度的影响 在相同最大吸收波长656nm下，对刚配制好的各浓度叶绿素溶液进行紫外检测测定吸光度，分析叶绿素的吸光度对浓度的关系是否符合朗伯-比尔定律.实验的到的数据如表1-1所示. 表1-1 叶绿素吸光度与浓度关系表 浓度（mg/ml） 0.05 0.1 0.2 0.3 0.4 吸光度 0.183 0.444 0.923 1.427 1.931 根据以上数据，以吸光度对浓度做回归曲线，计算出回归方程，如图1-2所示. 图1-2 叶绿素吸光度与浓度关系曲线 叶绿素浓度与吸光度的关系曲线满足：y=4.9757-0.063 (R2=0.9999)，可见叶绿素在浓度值为0.05~0.4mg/mL范围内，其与吸光度呈现一定的线性关系，符合朗伯-比尔定律.故在以下不同光照时间中，只选取了0.4mg/mL浓度的叶绿素溶液作为实验检测. 1.2.4 光源和光照时间的影响 分别采用红光、黄光、绿光、蓝光、紫光、白光