原核微生物基因敲除策略的研究进展.pdfVIP

•578 • 43  5 2016  9 国际口腔医学杂志 第 卷 期 年 月 原核微生物基因敲除策略的研究进展 1 1,2 1,2 阳燕 杨英明 胡涛 1.口腔疾病研究国家重点实验室 华西口腔医院牙体牙髓病科（四川大学） 成都 610041； 2.口腔疾病研究国家重点实验室 华西口腔医院预防科（四川大学） 成都 610041 [摘要]  基因敲除是一项20世纪80年代末发展起来的新型分子生物学技术，在微生物领域的机制和功能研究中， 具有极其重要的意义。经过数十年的发展，基因敲除技术从最传统的同源重组策略发展出λRed重组系统、Cre- loxP重组系统等方法，近年又诞生了成簇的规律间隔的短回文重复序列/Cas9等基于核酸内切酶原理的高效打靶技 术，将微生物基因功能研究推向新的高度和方向。本文就这些应用于原核微生物的基因敲除策略的原理、现状和 前景等研究进展作一综述。 [关键词] 基因敲除； 聚合酶链反应； 连接诱变技术； λRed重组系统； Cre-loxP重组系统； 成簇的规律间隔的短 回文重复序列/Cas9技术 [中图分类号] Q 756 [文献标志码] A [doi] 10.7518/gjkq.2016.05.019 1 1,2 Research progress on the knockout techniques of prokaryotic microorganisms Yang Yan , Yang Yingming , Hu Tao1,2. (1. State Key Laboratory of Oral Diseases, Dept. of Conservative Dentistry and Endodontics, West China Hospital of Stomatology, Chengdu 610041, China; 2. State Key Laboratory of Oral Diseases, Dept. of Preventive Dentistry, West China Hospital of Stomatology, Sichuan University, Chengdu 610041, China) This study was supported by Special Prophase Project on National 973 Program(2012CB526707) and National Natural Science Foundation of China. [Abstract] Gene knockout is a new molecular technique that developed in 1980s which has plays crucial roles in the microbiology functional and basic research. Through the development of several decades, gene knockout technique has been evolved from traditional homogenous recombination to λRed recombination and Cre-loxP system. Recently, the