金鱼头瘤形成相关基因差减文库的构建与分析-华中农业大学学报.pdfVIP

金鱼头瘤形成相关基因差减文库的构建与分析-华中农业大学学报.pdf

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第 卷 第 期 华 中 农 业 大 学 学 报 33 1 Vol.33 No.1 年 月 , 2014 1 JournalofHuazhon A riculturalUniversit Jan.201485~91 g g y 金鱼头瘤形成相关基因差减文库的构建与分析 , , , 张运超12 何 川12 顾泽茂23 , ; , ; 1.北京市水产技术推广站 北京 100021 2.华中农业大学水产学院 武汉430070 , 3.淡水水产健康养殖湖北省协同创新中心 武汉 430070 摘要 采用差减抑制杂交技术( )以 龄红狮头金鱼( )的头瘤组织为检测子( ), SSH 1 Carassiusauratus Tester ( ), 。 40日龄红狮头金鱼幼鱼的头顶上皮组织为驱动子 Driver 构建金鱼头瘤相关基因的差减 cDNA文库 以鲫管 10 , , 。 家基因 为参照检测差减效率 结果表明该文库差减效率达 倍 效率较高 随机挑选阳性克隆进行接 α-tubilin 2 , 。 头特异引物的PCR检测 结果表明插入片段均在 0.1~2.0kb之间 利用斑点杂交对 PCR检测结果为单一条 , 。 、 带的阳性克隆进行筛选并测序 获得高差异性的有效序列 条 通过生物信息学方法对文库序列进行比对 分 93 , / , 类和注释 发现若干结缔形成基因和原癌 抑癌基因等与金鱼头瘤形成相关的功能基因 表明 cDNA文库构建 成功。 ; ; ; 关键词 金鱼 头瘤 差减抑制杂交 文库 cDNA 中图分类号 文献标识码 文章编号 ( ) Q785 A 1000-2421201401-0085-07 ( ) , 、 。 金鱼 Carassiusauratus在分类学上属于鲤形 针对性和目的性不强 且耗时 耗

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