重组猪ifn—a原核表达及其活性分析.pdfVIP

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2017-11-11 发布于天津
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第3I卷第1I期中国预防兽医学报 V01．31。No．1l ChineseJournalofPreventive Medicine Nov．2009 2009年11月 Veterinary 重组猪IFN—a原核表达及其活性分析高明。魏华’ (沈阳农业大学畜牧兽医学院，辽宁沈阳110161) 摘要：为了表迭猪重组0【干扰素(rlrN．d)并对它的生物学特性进行研究，本研究采用l盯．PCR从猪脾淋胛G诱导猪rIFN．d获得了表达，其分子量约22l(u。该重组蛋白以包涵体形式存在，其表达量占总菌体蛋白7％。细胞病变抑制法测定表明，其稀释度在小于I：103时才有抗病毒活性。本实验表达的猪r删．d具有一定的抗病毒活性，为研究具有广谱抗病毒效应的猪干扰素具有重要意义。关键词：猪；重组Ot干扰素；原核表达 1-0902-04 中图分类号：$852．4 文献标识码：A 文章编号：1008．0589(2009)1 ofrecombinant Expression porcinealpha-interferon inE．coliandtheanti—virus activityanalysis GAO Ming，WE]Hua ofAnimal and Agricultural 1 (College HusbandryVeterinary，ShenyangUniversity，Shenyang10161，China) Abstract：Porcine 1 WaS RT-PCRfrom and alphainterferon(IFN·dgene amplifiedbyusing pigspleenlymphocytes into vector．transformedintohostbacteriaBL21．RecombinantIFN-aWaSabout22ku subcloned pPROExHTaexpression porcine for tO7％oftotalbacterial rIFN-Of．achievedtoabove byIPTG-induction，accountedup protein．Porcine purity 80％by expressed metalchelate rIFN-d aanti—vesicularstomatitisvirus at Nj—Ni chromatographypurification，Thepossessed activity affinity 2900 IU／mg． alpha—interferon；prokaryoticexpression Keywords：porcine；recombinant 干扰素(Interferon，IFN)是一类重要的细胞因IFN是动物体中目前所知作用最快的第一防御子，具有种属特异性，在同种细胞上具有广谱的抗体系，人和鼠的IFN已得到深入的研究，但对猪的病毒、抑制肿瘤细胞增殖、免疫调节等多种生物活