白细胞介素-1α与其!型可溶性受体的相互作用及动力学特征-分析化学.pdfVIP

第34 卷 分析化学 （FENXI HUAXUE ） 研究报告 第6 期 2006 年6 月 Chinese Journal of Analytical Chemistry 769 ～ 772 白细胞介素-1α 与其 型可溶性受体的相互作用及动力学特征 ! 吴宝艳 黄加栋 李 静 宋 昭 王艳艳 王新胜 陈强# （南开大学生命科学学院，天津30007 1） 摘 要 研究了基于亲和型生物传感器的白细胞介素-1α （IL-1α ）与I 型可溶性白细胞介素-1 受体（sIL-1R ）相互作用的实时监测，并应用FASTfit 软件对数据进行拟合分析。采用共价交联法在样品池表面固定sIL- Ⅰ 1R ，其密度为2 . 13 ng/ mm2 ，用于检测不同浓度IL-1 与sIL-1R 的结合所引起响应信号变化。对浓度为 Ⅰ α Ⅰ 2400 nmol/ L IL-1α 的响应信号为122 . 66 弧度秒，并且响应信号同IL-1α 浓度呈线性关系，相关系数为0. 972 。 FASTfit 拟合数据结果表明IL-1 与sIL-1R 相互作用符合一级动力学方程，其误差值不超过0 . 5 弧度秒，其 α Ⅰ 解离平衡常数（ - 6 5 KD ）和结合平衡常数（KA ）分别为4 . 15 × 10 mol/ L 和2 . 4 1 × 10 mol/ L 。验证了亲和型生物 传感器研究IL-1 和sIL-1R 相互作用及动力学分析的可行性，有助于阐明IL-1 和sIL-1R 的重要生物学 α Ⅱ α Ⅰ 功能，并为快速筛选其拮抗剂研究提供了理论和实验数据。 关键词 白细胞介素-1α ，I 型可溶性白细胞介素-1 受体，生物传感器 1 引 言 白细胞介素1（IL-1 ）是前炎性和免疫反应的主要诱导细胞因子，IL-1 的生物活性由IL-1 、IL-1 与 α β ［1，2 ］ ［3 ～ 5 ］ 细胞表面的IL-1 受体（IL-1R ）结合来发挥作用表达的 ，IL-1 参与多种疾病的发生 。IL-1R 由 IL-1R 和IL-1R 组成，而细胞表面受体的胞外部分经蛋白酶切割可产生其可溶性形式，分别为 Ⅰ Ⅱ sIL-1R 和sIL-1R ［6 ］。目前，sIL-1R 被认为是治疗IL-1 介导疾病最具前景性的方案之一。 Ⅰ Ⅱ IL-1 和sIL-1R 的检测及相互作用的研究常采用酶联免疫吸附分析法或放射免疫技术等。但是，这 些检测方法普遍存在一些缺陷如操作繁琐、时间长、样品需要标记，并且只能检测二者平衡结合量，难于 监测其相互作用过程和动力学分析［7 ］。而基于RM （resonant mirror ）模式的亲和型生物传感器，可以实 时监测生物大分子间结合和解离过程的连续反应，并可以监测可逆性程度，也可详尽地研究生物分子相 互作用的动力学过程，而且样品不需要标记，需要量少