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林 业 科 学 研 究 2005 ,18 3 :231～235
Forest Research
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文章编号 2005
甜菜碱合成调控基因共表达载体的
构建与抗盐初步研究
1 ,2 1
高志民 , 彭镇华
( 1 中国林业科学研究院林业研究所 ,北京 100091 ; 2 国际竹藤网络中心 ,北京 100102)
摘要 :甘氨酸甜菜碱是植物体内重要的渗透调节物质 ,通过逐步克隆方法 ,将甜菜碱合成途径中编码三个关键酶
(PEAMT 、CMO 和 BADH) 的基因构建到同一表达载体中 ,并经过酶切检测 ,证明得到了正确表达载体质粒 ———pCBP 。
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将 pCBP 转入农杆菌 GV3101 ,用真空渗透法转化拟南芥 Col0 植株 ,通过抗性筛选获得了转基因植株 , PCR 检测证
实三个 目的基因已经转入到拟南芥植株中。抗盐性检测表明 ,在含NaCl 125 mmol ·L - 1 的 1/ 2MS 培养基上 ,转基因植
株的生长明显优于 Col0 。
关键词 :甜菜碱 ;表达载体 ;抗盐
中图分类号 :Q75 文献标识码 :A
Construction of Coexpressing Vector for Gly Bet Synthesis and Salt Tolerance
1, 2 1
GA O Zhimin , PEN G Zhenhua
( 1Research Institute of Forestry , CAF , Beijing 100091 ,China ; 2International Center for Bamboo and Ratten ,Beijing 100102 ,China)
Abstract :Glycine betaine ( GlyBet) is an established target for metabolic engineering of stress tolerance because it is a potent os
moprotectant that many plants lack . GlyBet is synthesized in the chloroplast by a twostep oxidation of choline (Cho) that is cat
alyzed by CMO and BADH. Cho is one of essential precursors for the synthesis of GlyBet . PEAMT is a key enzyme in the Cho
biosynthetic pathway and serves as a steplimiting controller . The CMO cDNA and BADH cDNA drived by 35S and the PEAMT
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gen
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