土贝母苷甲对人鼻咽癌上皮细胞MAPK活性的影响.pdfVIP

土贝母苷甲对人鼻咽癌上皮细胞MAPK活性的影响.pdf

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·实验研究· 土贝母苷甲对人鼻咽癌上皮细胞 MAPK活性的影响 刘姬艳马润娣于立坚 土贝母Bollx堪tauma pa曲c11】施助(Maxim.) Fnmquet(Cucarbitaceae)是一种传统中药,载于 清代赵学敏氏编著的本草纲目拾遗。古代 小鼠抗人单克隆抗体p-ERK、羊抗小鼠单克隆 用它的块茎来治疗乳岩、乳痈、乳腺增生和瘰 抗体IgI昼腿P购自SantaC眦公司。高分子量 疬等疾患。临床上显示出明显的散结毒、消痈 标准蛋白质购自上海西巴斯生物技术开发有 肿效果【lJ。四川省和陕西省的老中医用它来 限公司。其余均为国产分析纯试剂。 治疗食道癌和胃癌,效果显著,但因恶心、呕吐 等消化道副作用而限制了它的临床应用。我 们从1978年开始从生药土贝母块茎中分离、 纯化抗癌活性成分土贝母皂苷,并对其中得率 最高(1.9%)、水溶性和稳定性较好的苷甲进 行了较系统的研究【2。】。证实它有强抗肿瘤[5】 和抗促癌作用【6.。此前我们发现苷甲有诱导 肿瘤细胞分化【.】、周期阻滞和凋亡作用【,’10Jo ,,一o、I basic 本文以牛髓鞘碱性蛋白(Bovinemyelin ..艇≯ ^■ pmcein,hmP)为底物,根据30℃时MAPK可将 TubcimtBidel 其磷酸化的原理,采用放射自显影、液闪和蛋 图l 白质免疫印迹法检测MAPK活性,研究苷甲对 1.3细胞培养 MAPK细胞信号转导通路的影响,探讨其抗肿 人低分化鼻咽癌上皮细胞株(human poody 瘤作用的机制。 eaminmm di伍嘲嘲痂曲ed珑嘲印kI工3砌r18eal epithelial l材料和方法 cell 1.1苷甲 供。以含体积分数为10%灭活超级无支原体新 化学结构如图l【l¨.自土贝母块茎分离纯 生牛血清、100 化,纯度98.5%o实验前定量称取,紫外线 的RPMI 照射无菌。无菌蒸馏水溶解。-200C冰箱保存 条件下培养。质量分数为0.5%胰酶与质量分 备用。 数为0.1%EDTA等体积混合消化细胞,隔日传 1.2试剂 代1次。取对数生长期细胞用于实验。 超级无支原体新生牛血清购自杭州四季 1.4药物处理 青生物材料有限公司。RPMI1640购自Hy- Clme公司。【7.霉P】.ATP购自北京市福瑞生物 皿l培养瓶中,每瓶10ml(含1.0X10细胞)。 作者单位;5舶啦5

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