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·实验研究·
土贝母苷甲对人鼻咽癌上皮细胞
MAPK活性的影响
刘姬艳马润娣于立坚
土贝母Bollx堪tauma
pa曲c11】施助(Maxim.)
Fnmquet(Cucarbitaceae)是一种传统中药,载于
清代赵学敏氏编著的本草纲目拾遗。古代 小鼠抗人单克隆抗体p-ERK、羊抗小鼠单克隆
用它的块茎来治疗乳岩、乳痈、乳腺增生和瘰 抗体IgI昼腿P购自SantaC眦公司。高分子量
疬等疾患。临床上显示出明显的散结毒、消痈 标准蛋白质购自上海西巴斯生物技术开发有
肿效果【lJ。四川省和陕西省的老中医用它来 限公司。其余均为国产分析纯试剂。
治疗食道癌和胃癌,效果显著,但因恶心、呕吐
等消化道副作用而限制了它的临床应用。我
们从1978年开始从生药土贝母块茎中分离、
纯化抗癌活性成分土贝母皂苷,并对其中得率
最高(1.9%)、水溶性和稳定性较好的苷甲进
行了较系统的研究【2。】。证实它有强抗肿瘤[5】
和抗促癌作用【6.。此前我们发现苷甲有诱导
肿瘤细胞分化【.】、周期阻滞和凋亡作用【,’10Jo
,,一o、I
basic
本文以牛髓鞘碱性蛋白(Bovinemyelin ..艇≯
^■
pmcein,hmP)为底物,根据30℃时MAPK可将 TubcimtBidel
其磷酸化的原理,采用放射自显影、液闪和蛋
图l
白质免疫印迹法检测MAPK活性,研究苷甲对
1.3细胞培养
MAPK细胞信号转导通路的影响,探讨其抗肿
人低分化鼻咽癌上皮细胞株(human
poody
瘤作用的机制。
eaminmm
di伍嘲嘲痂曲ed珑嘲印kI工3砌r18eal epithelial
l材料和方法
cell
1.1苷甲
供。以含体积分数为10%灭活超级无支原体新
化学结构如图l【l¨.自土贝母块茎分离纯
生牛血清、100
化,纯度98.5%o实验前定量称取,紫外线
的RPMI
照射无菌。无菌蒸馏水溶解。-200C冰箱保存
条件下培养。质量分数为0.5%胰酶与质量分
备用。
数为0.1%EDTA等体积混合消化细胞,隔日传
1.2试剂
代1次。取对数生长期细胞用于实验。
超级无支原体新生牛血清购自杭州四季
1.4药物处理
青生物材料有限公司。RPMI1640购自Hy-
Clme公司。【7.霉P】.ATP购自北京市福瑞生物
皿l培养瓶中,每瓶10ml(含1.0X10细胞)。
作者单位;5舶啦5
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