食品中沙门氏菌实时荧光核酸恒温扩增检测sat-中国分析测试协会.pdfVIP

T/CAIA/SH009-2017 T/CAIA 中国分析测试协会标准 T/CAIA/SH009-2017 食品中沙门氏菌实时荧光核酸恒温扩增 检测 （SAT）方法 Real-Time Simultaneous Amplification and Testing (SAT) method for detecting Salmonella spp in foods 2017-07-20 发布 2017-10-01 实施 中国分析测试协会发布 I T/CAIA/SH009-2017 前 言 本标准按照GB/T 1.1-2009 规则起草。 本标准由中国分析测试协会标准化委员会提出并归口。 本标准起草单位：上海交通大学公共卫生学院、中国科学院上海生命科学研究院、上海仁度生物 科技有限公司。 本标准的附录A 、附录B 为资料性附录，附录C 为规范性附录。 本标准主要起草人：王慧、储瑞蔼、邱红玲、张常娥、于明辉。 本标准为首次发布。 II T/CAIA/SH009-2017 食品中沙门氏菌实时荧光 核酸恒温扩增检测（SAT）方法 1 范围 本标准规定了食品中沙门氏菌（Salmonella spp ）的SAT 检验技术方法。 本标准适用于肉类、蛋品、乳制品及其加工食品等食品中的沙门氏菌的检验。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本部分。 GB 4789.4 食品安全国家标准 食品微生物学检验 沙门氏菌检验 GB 4789.1 食品安全国家标准 食品微生物学检验 总则 GB /T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB 19489 实验室 生物安全通用要求 GB/T 27403 实验室质量控制规范 食品分子生物学检测 GB/T 27405 实验室质量控制规范 食品微生物检测 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本标准 恒温扩增实时荧光检测技术（Simultaneous Amplification and Testing ，SAT）：指RNA 恒温扩增实时 荧光检测技术。 4 SAT 原理 在同一温度下，以细菌RNA 为起始模板，通过M-MLV 反转录酶产生靶标RNA 的一个双链DNA ， 然后利用T7 RNA 多聚酶以该DNA 为模板产生多个（100～1000）RNA 拷贝；每个RNA 拷贝数再从 3 T/CAIA/SH009-2017 反转录开始进入下一个扩增循环；同时，带有荧光标记的优化探针和这些 RNA 拷贝特异结合后，打 开茎环结构，从而产生荧光，根据实时荧光信号的出现时间和强度，结合阳性对照和阴性对照即可对 检测结果进行判定。 5 材料和设备 除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其它设备如下： 5.1 实时荧光恒温检测系统。 5.2 台式离心机。 5.3 恒温培养箱：36