小鼠线粒体解偶联蛋白1ucp1elisa试剂盒检测范围最低检测限.pdfVIP

96T 仅供体外研究使用，不用于临床诊断! 小鼠线粒体解偶联蛋白1(UCP1)ELISA试剂盒 本试剂盒运用双抗体夹心ELISA法定量测定小鼠血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清液和其他生物液体中小鼠线粒 体解偶联蛋白1(UCP1)含量。 检测范围 0.156-10ng/mL 最低检测限 0.061ng/mL 实验原理 将小鼠线粒体解偶联蛋白1(UCP1)抗体包被于96孔微孔板中，制成固相载体，向微孔中分别加入标准品或标本，其中的小鼠线粒体 解偶联蛋白1(UCP1)与连接于固相载体上的抗体结合，然后加入生物素化的小鼠线粒体解偶联蛋白1(UCP1)抗体，将未结合的生物 素化抗体洗净后，加入HRP标记的亲和素，再次彻底洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的 作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的小鼠线粒体解偶联蛋白1(UCP1)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度 (O.D.值)，计算样品浓度。 试剂盒内容 试剂名称 数量 试剂名称 数量 96孔板(预包被) 1 96孔板覆膜 2 标准品 0.5ml×1 标准品稀释液 1.5ml×1瓶 显色剂A液 6ml×1瓶 样品稀释液 6ml×1瓶 显色剂B液 6ml×1瓶 终止液 6ml×1瓶 酶标试剂 6ml×1瓶 密封袋 1 浓洗涤液(30×) 1×20mL 使用说明书 1 小鼠线粒体解偶联蛋白1(UCP1)ELISA试剂盒需自备的设备及试剂 1. 450±10nm滤光片的酶标仪(建议仪器使用前提前预热) 2. 单道或多道微量加液器及吸头 3. 稀释样品的EP管 4. 蒸馏水或去离子水 5. 吸水纸 1 6. 盛放洗液的容器 试剂盒的储存及有效期 1. 未开封的试剂盒：所有试剂均按试剂瓶标签上所示保存。请注意，收到试剂盒后请尽快将TMB 洗涤液，终止液保存于4℃， 其他试剂保存于-20℃。 2. 使用后的试剂盒：剩余试剂仍需按照试剂瓶标签所示的温度保存，开封后的酶标板要加干燥剂后密封保存于-20℃，避免潮 湿。 注意： 试剂盒内酶标条可拆卸，按实验需求可分多次使用；使用后的剩余试剂盒建议在首次实验后 1个月内使用完毕。产品过期时间以盒 子上的标签为准，保质期内所有组分都确保是稳定的。 小鼠线粒体解偶联蛋白1(UCP1)ELISA试剂盒标本的采集与保存 1. 血清： 将收集于血清分离管的全血标本在室温放置 2 小时或 4C 过夜，然后 1000×g 离心 20 分钟，取上清即可，或将上清置o o o 于-20C 或-80C 保存，但应避免反复冻融。 2. 血浆： 用 EDTA 或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的 30 分钟内于 2-8C 1000×g 离心 15 分钟，取上清即可检测，o 或将上清置于-20C或-80C 保存，但应避免反复冻融。o o 3. 组织匀浆： 1） 取适量组织块，于预冷PBS （0.01mol/L, pH 7.0-7.2）中清洗去除血液，称重后备用 （组织块较大需先剪碎后再匀浆）； 2） 可同时选用多种匀浆方法达到较好的破碎效果：首先将组织块移入玻璃匀浆器，加入5-10mL 预冷PBS 进行充分研磨， 该过程需在冰上进行 （有条件实验室可选用机器匀浆）；得到的匀浆液可再利用超声破碎或反复冻融 进一步处理 （超声破碎 过程中注意冰浴降温；反复冻融法可重复2次）。 3） 将制备好的匀浆液于5000×g 离心5 分钟，留取上清即可检测。 4. 细胞裂解液： 1）贴壁细胞需要先用胰酶消化，离心收集细胞