茎－环rt-pcr法定量mirna-421的引物设计-南京师范大学学报.pdfVIP

35 2 ( ) Vol． 35 No． 2 第 卷第 期 南京师大学报 自然科学版 2012 6 JOURNAL OF NANJING NORMAL UNIVERSITY (Natural Science Edition) 年 月 June ，20 12  － RT-PCR miRNA-421 茎 环 法定量 的引物设计 ， ， 赵 丽 杨 洋 温传俊 ( ， 210046) 南京师范大学生命科学学院分子细胞生物学研究所 江苏南京 ［ ］ － RT-PCR ， miRNA-421 PCR ， 摘要 本研究旨在通过茎 环 法 建立有效定量 的 方法 探讨该方法在定量检测 miRNA ． miRBase miRNA-421 ． 3 miRNA-421 方面的应用价值 利用 数据库获得 的成熟序列 设计 条 特异性反转录 ，Q-PCR ． 10 RNA ，RT-PCR 引物 上游引物及通用下游引物 通过 倍梯度稀释 后特异性反转录 分析不同引物互相 PCR ， 、 ． ， 配对 的扩增曲线及熔融曲线 鉴定出特异性好 扩增效率高的引物 为进一步鉴定引物的有效性 过表达 miRNA-421， ． － RT-PCR 、 miRNA-421 :421RT7 、F19 ， 用鉴定的成熟引物定量扩增 利用茎 环 法设计 鉴定出 引物 且 、 ． ， － RT-PCR miRNA ， 这对引物特异性好 扩增效率高 通过设计引物组合 茎 环 法能够很好地用于 定量分析 并具 、 、 ． 有准确 快速 节约成本的优点 ［ ］ － RT-PCR ，miRNA-421， 关键词 茎 环 引物设计 ［ ］Q28 ［ ］A ［ ］1001-4616 (2012)02-0083-06 中图分类号