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请画出制备单克隆抗体的过程图解。 * * 专题二 细胞工程 2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体 一、动物细胞融合 自学讨论题： 画出动物细胞融合过程的概念图。 弄清动物细胞融合的方法、原理及意义。 理解什么是灭活及灭活病毒诱导细胞融合的原理 一、动物细胞融合 细胞A 灭活病毒 诱导细胞融合 有丝分裂 动物细胞融合过程： 原理： 细胞膜的流动性 细胞B 融合的细胞 杂种细胞 概念： 动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞形成一个细胞的过程。 一、动物细胞融合 诱导方式 物理法 化学法 生物法： 灭活的病毒 灭活的仙台病毒 丧失感染性 （不感染细胞） 保留原有的抗原决定簇 （诱导细胞融合） 方法： 一、动物细胞融合 突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能。 成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段 特别是利用杂交瘤技术制造单克隆抗体 意义： 应用： 获得抗体的传统途径是什么？这种方法获得的抗体有什么缺陷？ 怎样获得大量的单一抗体？ 二、单克隆抗体 抗原 刺激 浆细胞 抗体 特异性差、纯度低；产量低、反应不够灵敏 传统血清抗体的制备途径： 二、单克隆抗体 动物体 传统血清抗体的制备的缺陷： 一个B淋巴细胞 （只分泌一种特异 性抗体） 小鼠骨髓瘤细胞 （能无限增殖） 杂种细胞 （既能增殖又能产生抗体） 二、单克隆抗体 自学讨论题： 二、单克隆抗体 1.注射抗原的目的是什么？ 2. 融合后培养液中有几种细胞？ 3.选择杂交瘤细胞的两步筛选的目的各是什么？ 4.为何要进行克隆化培养和专一抗体检测，为什么要多次筛选？ 骨髓瘤细胞 二、单克隆抗体 小鼠 注射特定抗原 浆细胞 (效应B细胞) 培养骨髓瘤细胞 杂交细胞 诱导融合 杂交瘤细胞 （ B-瘤细胞） 选择培养 克隆化培养 抗体检测 杂交瘤细胞 体外培养 小鼠腹腔内增殖 单克隆抗体 单： 克隆： 抗体： 单个细胞 无性繁殖 化学性质单一，特异性强 二、单克隆抗体 单克隆抗体的概念： 由一个效应B淋巴细胞经过无性繁殖形成的一个细胞群产生的化学性质单一，特异性强的抗体，即单克隆抗体。 单克隆抗体的特点： 特异性强、灵敏度高、产量大 单克隆抗体的应用： 二、单克隆抗体 ①作为诊断试剂：准确识别各种抗原物质，并与特异性结合 ②用于 运载药物：制成“生物导弹” 治疗疾病：主要用于癌症治疗 原理：已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有这两条DNA合成途径，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径，但能不断分裂增殖