条斑紫菜半胱氨酸合成酶基因的电子克隆与分析-中国水产科学.pdfVIP

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2017-11-11 发布于天津
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条斑紫菜半胱氨酸合成酶基因的电子克隆与分析-中国水产科学.pdf

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第16卷第4期中国水产科学 Vol.16 No.4 2 0 0 9 年 7 月 Journal of Fishery Sciences of China J u l y 2 0 0 9 条斑紫菜半胱氨酸合成酶基因的电子克隆与分析 1 1 1 2 易乐飞，王萍，周向红，刘楚吾（1.淮海工学院江苏省海洋生物技术重点实验室，江苏连云港 222005；2.广东海洋大学水产学院，广东湛江 524088）摘要：从网络共享的条斑紫菜（ Ueda）表达序列标签（expressed sequence tag，EST）数据库检索出与拟南芥 Porphyra yezoensis （）半胱氨酸合成酶（cysteine synthase，）基因高度相似的EST序列，构建EST叠连群（contig），并依据 Arabidopsis thaliana CSase - - contig 设计引物。提取条斑紫菜叶状体总RNA，采用RT PCR方法，扩增得到了条斑紫菜半胱氨酸合成酶基因（） PyCSase B - 的cDNA序列（GenBank accession：FJ232911）。该cDNA序列含有长1 152 nt的完整开放阅读框，编码产物（PyCSase B）的分 - - 子量39.3 kD，长383 AA。PyCSase B的N端前60个氨基酸残基构成了叶绿体转运肽序列，成熟的PyCSase B定位在叶绿体 - 中。PyCSase B与紫红紫菜（）、莱茵衣藻（）、拟南芥和水稻（）的序列一致性 P. purpurea Chlamydomonas reinhardtii Oryza sativa - - 分别为94％、69％、64％和65％，进化树显示PyCSase B在进化上处在细菌和高等植物之间。PyCSase B含有与5′-磷酸吡哆醛（Pyridoxal 5′-phosphate）和 -乙酰丝氨酸（ -acetylserine）结合的保守氨基酸残基