大豆多粒荚特异材料bac文库的构建.pdfVIP

２０１０年６月 中国油料作物学报 ２０１０，３２（２）：１９１－１９５ Ｃｈｉｎｅｓｅｊｏｕｒｎａｌｏｆｏｉｌｃｒｏｐｓｃｉｅｎｃｅｓ 大豆多粒荚特异材料 ＢＡＣ文库的构建 １，２ １ １ １ １ 许靖曼 ，魏文辉 ，沙爱华 ，单志慧 ，周新安 （１．中国农业科学院油料作物研究所，农业部油料作物生物学重点开放实验室， 湖北 武汉４３００６２；２．中国农业科学院研究生院，北京 １０００８１） 　　摘要：利用大豆重组自交系中的一个多粒荚家系Ｑ１００１，构建了一个大豆ＢＡＣ文库（ｂａｃｔｅｒｉａｌａｒｔｉｆｉｃｉａｌｃｈｒｏｍｏ ｓｏｍｅｌｉｂｒａｒｙ）。该文库包含５４９１２个克隆，平均插入片段达１２５ｋｂ，相当于大豆单倍体基因组大小的６．１２倍。随机 挑选４个大于１００ｋｂ的克隆进行稳定性继代实验，经１００代后插入的ＤＮＡ片段仍然稳定存在。该 ＢＡＣ文库的建 成，为下一步开展大豆产量相关基因的克隆打下基础。 关键词：ＢＡＣ文库；大豆；产量相关性状 中图分类号：Ｓ５６５．１０３　　文献标识码：Ａ　　文章编号：１００７－９０８４（２０１０）０２－０１９１－０５ ＢＡＣｌｉｂｒａｒｙｆｒｏｍａｓｏｙｂｅａｎｌｉｎｅ １，２ １ １ １ １ ＸＵＪｉｎｇ－ｍａｎ ，ＷＥＩＷｅｎ－ｈｕｉ，ＳＨＡＡｉ－ｈｕａ，ＳＨＡＮＺｈｉ－ｈｕｉ，ＺＨＯＵＸｉｎ－ａｎ （１．ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＯｉｌＣｒｏｐＢｉｏｌｏｇｙ，ＭｉｎｉｓｔｒｙｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ，ＯｉｌＣｒｏｐｓＲｅｓｅａｒｃｈＩｎｓｔｉｔｕｔｅ，ＣＡＡＳ，Ｗｕｈａｎ ４３００６２，Ｃｈｉｎａ；２．ＧｒａｄｕａｔｅＳｃｈｏｏｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１０００８１，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＡｓｏｙｂｅａｎＢＡＣｌｉｂｒａｒｙ（ｂａｃｔｅｒｉａｌａｒｔｉｆｉｃｉａｌｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｌｉｂｒａｒｙ）ｗａｓｃｏｎｓｔｒｕｃｔｅｄｕｓｉｎｇａｇｒｅａｔｅｒ ｓｅｅｄｐｏｄｆａｍｉｌｙＱ１００１ｌｉｎｅｆｒｏｍｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔｉｎｂｒｅｄｌｉｎｅｓ．Ｔｈｅｌｉｂｒａｒｙｃｏｎｔａｉｎｅｄ５４９１２ｃｌｏｎｅｓ，ｗｉｔｈａｎａｖｅｒａｇｅ ｉｎｓｅｒｔｓｉｚｅｏｆ１２５ｋｂ．ＴｈｅＢＡＣｌｉｂｒａｒｙｗａｓｅｑｕｉｖａｌｅｎｔｔｏ６．１２ｔｉｍｅｓｏｆｓｏｙｂｅａｎｈａｐｌｏｉｄｇｅｎｏｍｅｓｉｚｅ．Ｆｏｕｒｃｌｏｎｅｓ ｇｒｅａｔｅｒｔｈａｎ１００ｋｂｗｅｒｅｓｅｌｅｃｔｅｄｒａｎｄｏｍｌｙｔｏｔｅｓｔｔｈｅｓｔａｂｉｌｉｔｙｏｆｓｕｂｃｕｌｔｕｒｅｃｌｏｎｅｓ．ＴｈｅｉｎｓｅｒｔｅｄＤＮＡｆｒａｇｍｅｎｔｓｒｅ ｍａｉｎｅｄｓｔａｂｌｅａｆｔｅｒ１００ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎｓ．ＴｈｉｓＢＡＣｌｉｂｒａｒｙｓｈｏｗｅｄｉｔｓｉｍｐｏｒｔａｎｃｅｔｏｆｕｎｃｔｉｏｎｉｎｇｇｅｎｅｃｌｏｎｉｎｇｆｏｒｓｏｙｂｅａｎ ｃｒｏｐ． Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ＢＡＣｌｉｂｒａｒｙ；Ｓｏｙｂｅａｎ；Ｙｉｅｌｄｒｅｌａｔｅｄｔｒａｉｔｓ ［１］ 　　大豆（ＧｌｙｃｉｎｅｍａｘＬ．）是我国主要的粮油作物 定位已有报道 ，这为研究每荚粒数基因奠定了基 之一，目前全国种植面积在８７０万公顷左右，总产约 础。构建大豆大片段基因组文库，对于产量相关基 １４００万吨。然而我国大豆消费量已超过５０００万 因的分离克隆有重要意义。 吨，国产大豆供给缺口极大。我国大豆产业竞争力 细菌人工染色体文库（ｂａｃｔｅｒｉａｌａｒｔｉｆｉｃｉａｌｃｈｒｏ 差，大豆单产仅为世界平均水平的四分之三，只有大