武汉大学分析化学下册18色谱法导论.pptVIP

第十八章色谱法导论 一、色谱过程和色谱图 二、色谱动力学基础理论 三、色谱定性分析 四、定量分析方法 一、色谱过程和色谱图 按固定相的几何形式分类： 1.柱色谱法 2.纸色谱法 3.薄层色谱法 按流动相的状态分类： 常用术语： 基线：在操作条件下，仅有纯流动相进入检测器时的流出曲线。 峰高与峰面积：色谱峰顶点与峰底之间的垂直距离称为峰高(peak height)。用h表示。峰与峰底之间的面积称为峰面积(peak area)，用A表示。 峰宽度： a、峰底宽 WD = 4σ=1.70 Wh/2 b、半高峰宽 Wh/2=2.355σ c、标准偏差峰宽 W0.607h= 2σ 保留值: 1) 保留时间?：从进样至被测组分出现浓度最大值时所需时间tR。 2) 保留体积 ：从进样至被测组分出现最大浓度时流动相通过的体积，VR。 死时间： 不被固定相滞留的组分，从进样至出现浓度最大值时所需的时间称为死时间(dead time)，tM。 死体积: 不被固定相滞留的组分，从进样至出现浓度最大值时流动相通过的体积称为死体积VM。 VM = tM F 0 （ F0为柱尾载气体积流量） 调整保留值: 　1) 调整保留时间：扣除死时间后的保留时间。 tR?= tR – tM 　2) 调整保留体积：扣除死体积后的保留体积。 VR ? = VR – VM 或 VR ? = tR ? F0 相对保留值（relative retention） 在相同的操作条件下，待测组分与参比组分的调整保留值之比，用ri，s 表示 分离度（resolution） 相邻两色谱峰保留值之差与两组分色谱峰底宽度平均值之比，用R表示。分离度是用来作为衡量色谱分离效率的指标。 ★ R 越大，表明两组分分离效果越好 ★ 保留值之差取决于固定液的热力学性质 ★ 色谱峰宽窄反映色谱过程动力学因素及柱效能高低 二、色谱动力学基础理论 1、塔板理论 (the plate model) 塔板理论基本假设 塔板理论的优缺点 2、速率理论 三、色谱定性分析方法 定性分析的任务是确定色谱图上各个峰代表什么物质。 1.利用保留值与已知物对照定性 （1）利用保留时间定性 在相同色谱条件下，将标准物和样品分别进样，两者保留值相同，可能为同一物质。 此方法要求操作条件稳定、一致，必须严格控制操作条件，尤其是流速。 （2）利用标准加入法定性 若样品复杂，流出峰距离太近，或操作条件不易控制，可将已知标准样品加到被测样品中，若被测组分峰高增加了，则可能含该已知物。 2.与其它分析仪器联用的定性方法 四、色谱定量分析方法 2、内标法 样品m（含mi被测组分） +纯物质作内标物ms 根据理论塔板高度的加和性, 得： H = HM ＋ HL＋HRM＋HRS 总塔板高度 = 纵向扩散板高 +流动相传质板高+ 固定相传质板高 即著名的范氏速率方程 对比塔板理论，速率理论的成功之处： ● 分离效率受流速的影响 ● 从本质上阐明影响谱带展宽的各种实验因素 速率理论方程式是选择色谱条件, 如填料粒度、填充均匀度、固定相性质及厚度、流动相组成及流速、柱温等的重要依据。 对给定色谱体系, 当其它实验条件确定后, u对H的影响（速率曲线）可由实验来测得。将u以外的参数视作常数, 则速率方程可简化为： H = A＋B/u＋Cu 式中A、B、C为常数。上式中三项分别代表涡流扩散、纵向分子扩散和两相传质阻力对总塔板高度的贡献。 绘制H-u图时, 应选择若干不同的线速，包含高、中、低线速，测定组分的色谱峰，计算出H值，然后作图。 小型化的台式色质谱联用仪（GC-MS；LC-MS） 色谱-红外光谱仪联用仪； 组分的结构鉴定 Sample Sample 5890 1.0 DEG/MIN HEWLETT PACKARD HEWLETT PACKARD 5972A Mass Selective Detector D C B A A B C D Gas Chromatograph (GC) Mass Spectrometer (MS) Separation Identification B