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细胞工程作业-杉植物组培研究
杉科植物组培情况综述
摘要:本文简述近几年以杉科植物中杉木和红豆杉为主要研究对象的组织培养的各项进展,对现有的杉科组织培养情况包括组培使用的培养基、组培影响因素、组培快繁技术体系以及正在进行研究的相关应用方面的内容进行评述,指出目前杉科植物研究中的问题并提出未来的杉科植物研究方向。也是为一些珍贵杉科树种的保存与繁殖提供一定的参考。
关键词:杉科植物 组织培养 研究综述
Abstract:Nutshell the progress about this plant tissue culture of Taxodiaceae in recent years, recite the current tissue culture conditions of Taxodiaceae including China fir and Taxus chinensis , points out existing problems in the study of Taxodiaceae and puts forward the future of Taxodiaceae research direction. For some precious Chinese fir branch is the preservation of the tree species, and breeding to provide certain reference
Key words:Taxodiaceae Tissue culture Studies Review, 现存10 属16 种[ 1] 。其中, 水杉、水松、北美红杉等为世界孑遗植物, 柳杉为我国特有树种。水杉、水松等已被1999 年国务院公布的《国家重点保护植物名录( 第一批)》列为一级保护植物。多数杉科树种属于用材树种, 也具有很高的观赏价值。
目前,绝大多数杉科树种以种子繁殖和扦插育苗为主, 但往往面临种子缺乏、发芽率偏低等困难, 而且实生苗变异大, 母株优良性状得不到保持; 扦插生根情况不稳定, 早期造林成活率低[ 2] 。因此有大量的学者对杉科树种的组织培养技术进行了大量的研究,得到了丰富的资料。笔者就能够收集到的国内外文献, 对影响杉科植物外植体组培的主要因素进行综述,以期为今后的杉科树种组培提供参考。
1. 杉科植物组培历史
目前,可以寻找到的最早的杉科植物组织培养技术[ 3]是在1979年所提出的研究。之后有关杉科植物研究工作一直延续到现在,几乎每年都有关于杉科植物的组培报告。在20世纪末因为杉科植物中红豆杉类植物体内紫杉醇[4-6]被人所知晓,使得更多的学者将目光投向了杉科植物。近几年由于研究的杉科植物种类的增加,以及不同杉科树种之间的差异,使得杉科树种的组织培养技术不断进步。
2. 杉木组织培养现状
2.1 组培培养基的确定
2.1.1杉木培养基
愈伤组织诱导:诱导杉木茎尖、顶芽和茎段产生愈伤组织用Ms (Ms或怀特)+BA0.5(毫克/升)+2.4一D 0.5-2.0(毫克/升)效果最佳[7.8]。而诱导花药愈伤组织以于MS十2.4一D 1.0-1.5(毫克/升)诱导频率最高,而且质量好[9]。
芽的诱导:在MS或告MS或怀特培养基中,只需加入生长素0.2一0.5(毫克/升)和激动素0.5(毫克/升),就能诱导出大量的不定芽,甚至生长成苗茎。[10]
根的诱导:在添加20克/升蔗糖的怀特或含MS培养基中,附加NAA (IBA) 0.25一0.5(毫克/升)或IBA0.5(毫克/升)十IAA0.5(毫克/升)对诱导苗期、幼树上的外植体,附加IBA1.5(毫克/升)+ NAA0.5(毫克/升)诱导优树上的茎段[11],
2.1.2 红豆杉培养基
3月份采集的处于旺盛生长期的嫩枝最适宜腋芽的增殖培养;腋芽萌发及生长的最佳培养基为DCR+0.1 mg/LIBA+0.05 mg/L BA;最佳的生根培养基为White+0.2 mg/LIBA。当根长约0.5 cm时,移栽至营养钵中,在温度25,75%以上湿度下栽培30 d左右,逐渐加大光照强度,植株成活率可达90.1%。80 %[15]。刘佳佳等人认为在红豆杉愈伤组织的诱导方面,MS 培养基优于 B5、N6、SHN(SchenkHildebrandt New)等培养基,继代培养以 B5培养基为好,愈伤组织的生长以 B5和 SHN 培养基为好[16]。张宗勤等认为改良的 MS(即在培养基中增加硝态氮、减少铵态氮)培养基能明显促进愈伤组织的生长[17]。Barnes 将加拿大红豆杉的茎尖置于含 6-BA1mg·L-1的 WPM 培养基上培养,其腋芽生长良好[18]。Flores 等在White 培养基上培养短叶红豆杉离体胚时
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