波形蛋白影响PC12细胞神经分化的研究.pdfVIP

· 论 蕾 · JMedRes，Jan2017，Vo1．46No．1 波形蛋 白影响PC12细胞神经分化的研究 邵晓婷 陈 琪 郭俊霞 吴丽慧 摘 要 目的 探究波形蛋 白分子在 PC12细胞神经分化 中的作用。方法 用免疫 印迹方法检测 PC12H和 PC12L细胞 中 波形蛋白的表达情况 。用免疫 印迹方法检测 PC12H细胞和 PC12L细胞在 NGF处理前后波形蛋 白的表达情况 。构建波形蛋 白 干扰质粒 ，用免疫 印迹方法检测该质粒 的干扰效果 。分别将对 照质粒 、波形蛋 白干扰质粒 瞬时转染PC12H细胞 ，培养0、1、2、3天 观察与记录细胞的分化情况 ，用 Image—proplus软件定量分析这两组细胞 的平均神经突长度和含分化神经突细胞 的百分 比例。 结果 PC12H细胞 中波形蛋 白的表达 明显高于 PC12L细胞 (P=0．000)。NGF处理后 PC12H和 PC12L细胞 中波形蛋 白的表达 量均增加，且在 PC12L细胞中更明显 (P=0．000)。波形蛋 白干扰质粒能有效地抑制 PC12H细胞 中波形蛋 白的表达 (P= 0．000)。瞬时转染波形蛋 白干扰质粒能有效地抑制 PC12H细胞 的神经分化 ，定量分析结果显示干扰组细胞 的平均神经突长度 和含分化神经突细胞 的百分 比均 明显小于对照组，差异均有统计学意义 (P=0．000)。结论 波形蛋 白分子可 以促进 PC12细胞 的神经分化 。 关键词 波形蛋 白 PC12细胞 神经分化 中图分类号 R3 文献标识码 A DOI 10．11969／j．issn．1673-548X．2017．01．007 EffectofVlmentlnonNeuralDifferentiationofPC12Cells． ShaoXiaoting，ChenQi，GuoJunxia，eta1．DepartmentofChildren HealthCare，TheSecondAffiliatedHospitalYuyingChildrenSHospitalof WenzhouMedicalUniversity，Zhejiang325003，China Abstract Objectlve ToexplorethefunctionofvimentinonneuraldifferentiationofPC12cells．Methods Westernblotwasused todetectvimentinexpressionbetweenPC12H andPC12Lcells．W esternblotwasappliedtodetectvimentinexpressionofPC12cellsbe— foreandafterNGFtreatment．Vimentininterferencevectorwasconstructedandtheinterferenceeffectofvimentinexpressionwastestedby W esternblot．PC12H cellsweretransiently transfectedwith controlvector，vimentin interferencevector，respectively．Afterculturedfor 0day，1day，2days，3days，weobservedandphotographed themorphologyofcells．Theneuritelengthandthepopulation ofneurite— branchingcellswerequantifiedbyImage—proplussoftware．Results VimentinexpressioninPC12H cellswashigherthanPC12Lcells (P：0．000)．VimentinexpressioninPC12cellswasincreasedafterNGFtreatmentandthechangewasmoreremarkableinPC12Lcells (P=0．000)．Vimentininterferencevectorhadanoteworthysuppressioneffectonvimentinexpressi