红树内生菌代谢产物抑菌作用的初步观察.pdfVIP

第五届中南地区实验动物科技交流奢 论文汇编 红树内生菌代谢产物抑茵作用的初步观察 冷扬1。刘铀2 (1．广东医学院实验动物中心，湛江524023；2．湛江海洋大学生化中心，湛江524088) 【摘要】观察红树内生茵cIII一1代谢产物对金黄葡萄球菌、表面葡萄球菌、大 肠杆菌以及沙门氏茵等常见动物病原茵的抑茼效果。结果表明，cⅢ一l代谢产物对 金黄色葡萄球茵、埃希氏大肠杆菌有较强的抑制作用，且押茵活性随浓代谢产物浓度 的增加而增加；金黄色葡萄珠茵、表面葡萄球茼和埃希民大肠杆菌对8倍浓缩的CⅢ 一l代谢产物高度敏感，但沙门氏茼呈中度敏感。CⅢ一l浓缩样品与几种常用抗生 素的抑茵效果相当。 【关键词】红树：代谢产物；抑茵活性 红树植物(Mangroveplants)是热带、亚热带海区潮问带特有高等植物，为耐盐、常绿乔木或灌木， 在调节全球生态平衡及维持生物多样性方面起着十分重要的作用”J。我国对红树植物的研究大多 停留在生态学方面，很少涉及红树植物活性物质的提取、分离及其药理研究【2’3】，红树植物内生细菌 及其代谢产物的抗菌亦鲜见报道。本实验对一株内生细菌代谢产物的体外抑菌效果进行了初步观 察，并与常见抗生素的抑菌效果进行了比较，旨在从红树植物中筛选具有抗菌作用的生物活性物质， 为红树植物的进一步开发和利用提供依据。 I材料与方法 I．1材料 clii一1菌株为红树植物秋茄(Kandeliacandle)1叶片中分离的内生海洋细菌，经常规方法初步 鉴定为芽孢杆菌(Bacifius sp)，由本校何红教授提供。 菌种：供试葡萄球菌、大肠杆菌、沙门氏菌均由本校兽医教研室提供。 培养基：按常规方法制备LB、SS琼脂培养基及NB培养基。 药敏试纸：药敏试纸购自广东农垦中心医院检验科，每片药物含量：庆大霉素lOgtg。青霉素 lOlxg、氯霉素301xg、头孢他啶30“g、氨苄西林101tg、环丙沙星5斗g。 I．2方法 1．2．I红树内生菌培养物的制备 空冷冻干燥。 1．2．2供试菌悬液的制备 取金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和沙门氏菌菌株接种到LB培养基上，37。C培养1—2天，用接种环 挑单菌到3mlLB液体培养基中，37℃、200r／m震荡培养制备菌悬液。 234 论文汇编 第五届中南地区实验动物科技交流会 1．2．3不同浓度红树活性物质抑菌作用的比较[4,Sl 无菌操作下，取100止菌悬液均匀涂布于LB／SS平板，放置约30rain后，用移液器吸取各个浓度 红树提取物及原液各15山滴加在平板上。同时抗菌素药敏试纸作为对照，37。C培养I-2天，观察抑 菌圈的大小。抑菌效果的判定标准为：抑菌圈直径15ram时为高度敏感、10—15mm时为中度敏 感．7—9mm时为低度敏感、无抑菌圈者为不敏感。 2结果 2．1 CⅢ一1代谢产物的抑茵效果从表1可以看出，cⅢ一1代谢产物对供试病原菌都有一定的抑 制作用，浓缩8倍样品对金黄色葡萄球菌、表面葡萄球菌和埃希氏大肠杆菌呈高度敏感，对沙门氏菌 呈中度敏感。培养液原液及浓缩液对表面葡萄球菌的抑菌圈均15ram，属高度敏感，其原液对葡萄 球菌、埃希氏大肠杆菌就有较强的抑制作用，随着浓缩倍数增加，抑菌效果也呈上升趋势。我们注意 到，新鲜培养液对金黄色葡萄球菌、表面葡萄球菌等革兰氏阳性菌的抑菌作用较强，培养液经室温放 置数日或4t3放置2—3周后，对上述革兰氏阳性菌的抑菌作用减弱，而对大肠杆菌、沙门氏菌等革兰 氏阴性菌的抑菌活性增强。说明作用于革兰氏阳性菌的抑菌活性物质在常温下稳定性较差，其分解 产物对革兰氏阴性菌的抑制作用较强。另外，抑菌活性物质的作用效果还受到培养时间、温度、pH 值等因素的影响，其分子结构、理化性质有待进一步研究。 表1不同浓度红树活性物质抑菌圈的大小(rllln)+ 表中数据为抑茵圈直径平均值，其中“一”表示无押茸图 图1 红树活性物质与抗生索抑菌活性的比较 235