应用绿色荧光蛋白报告基因优化辣椒的遗传转化体系.pdfVIP

园　艺 　学 　报 　2004 , 31 (6) : 737～742 Acta Horticulturae Sinica 应用绿色荧光蛋白报告基因优化辣椒的遗传转化体系 1 ,2 1 1 1 2 1 ,2 杨国顺 　谢丙炎 　杨宇红 　王晓武 　卢向阳 　蒋芳玲 (1 中国农业科学院蔬菜花卉研究所 , 北京 100081 ; 2 湖南农业大学园艺园林学院 , 长沙 410128) 摘 　要 : 以 ‘中椒 5 号’甜椒和 ‘湘研 10 号’辣椒子叶外植体为试料 , 绿色荧光蛋白 GFP 基因为报 告基因 , 通过观察检测愈伤组织的荧光表达与特异 PCR 扩增鉴定 , 分析了工程菌液 p H 值 、共培养基中乙 ( ) 酰丁香酮 AS 的浓度 、共培养时的温度与共培养时间对农杆菌转化辣椒效率的影响 。结果表明 , 在 p H - 1 52 、共培养基中加入 AS 200 μ 、23 ℃黑暗条件下 , 农杆菌与辣椒子叶共培养 5 d , 有利于辣椒子叶 mol ·L 的遗传转化 , ‘中椒 5 号’、‘湘研 10 号’愈伤组织荧光表达率均达到了40 % 。 关键词 : 辣椒 ; 子叶; 绿色荧光蛋白基因; 遗传转化 中图分类号 : S 6413 　　文献标识码 : A 　　文章编号 : 0513353X (2004) Improvement of Genetic Transformation System by Using GF P as Reporter Gene on Pepper 1 ,2 1 1 1 2 1 ,2 Yang Guoshun , Xie Bingyan , Yang Yuhong , Wang Xiaowu , Lu Xiangyang , and Jiang Fangling (1 Institute of Vegetables and Flowers , Chinese Academy of Agricultural Science , B eij ing 100081, China ; 2 Horticultural and L andscape College , Hunan Agricultural University , Changsha 410128 , China) Abstract : Effect of transferring efficiency of A grobacterium tumef aciens p H value 、concentration of AS added in cocultivation medium , temperature during cocultural stage and days for cocultivation were studied through PCR amplification and observation of green fluorescent protein expression by used GFP as reporter gen