微生物学检验(第3版)临床微生物标本检验.ppt

第十八章 临床常见标本的细菌学检验 临床病原体检查目的 感染性疾病的现状 感染性疾病的病原体：细菌、病毒、支原体、衣原体、立克次体 以及寄生虫等。 自从抗生素的发现和预防接种的实施，许多曾严重危害人体健康的病原体已消灭或基本消灭。 新的传染病陆续被发现，曾绝迹的老传染病部分死灰复燃。 条件致病菌感染比例增加。 多重耐药菌株不断出现，真菌感染的几率逐年增高。 临床病原体检查的基本程序 医生、护士、病人、检验师：正确采集运送标本。 检验科：直接镜检、免疫学和分子生物检测、病原体分离培养鉴定、药敏实验——报告结果。 医生：明确诊断、合理用药。 临床标本的采集、送检与处理原则 1、细菌学检验单 评估(充分准备、严格查对) Ⅰ采集标本前应先评估患者的病情、 心理反应与合作程度。 Ⅱ根据检验目的选择相应的标本容器 Ⅲ在容器外贴上检验单的副联 2、标本容器 3、采集时间和部位 为保证标本的质量，获得阳性结果，应掌握正确的标本采集方法、采集部位、采集量和采集时间并应及时送检，特殊标本还需注明采集时间。 4、无菌操作 （二）、临床标本及时送检 ①所有的标本都必须立即送往实验室，最好在2h内,保存时间不应超过24h. ②最佳的临床标本送检首先取决于所获取标本的量.量少的标本应在采集后15-30min内送检. ③对环境敏感的微生物如志贺菌、奈瑟氏菌和流感嗜血杆菌（对低温敏感）应立即处理，禁止冷藏脊髓液和生殖道、眼部、内耳道标本。 标本的拒收原则 无标签　不检测，并与送检的医生和护士联系。 送检延误　不接收，提醒送检者，要求重新采集。 送检容器不当或渗漏　不接收，告知送检者，要求重新采集。 标本的拒收原则 标本不符合要求　不接收，联系送检者，指出不符合要求之处，要求重新采集符合试验要求的标本. 同一天内收到同一检测目的的相同标本（血液标本除外）不检测，与送检者联系并说明标本重复不予处理，并在报告单上注明 临床常见标本 血液（生化、免疫及微生物检验） 尿液 粪便 痰及上呼吸道标本 穿刺液标本（脑脊液、胆汁、胸腹水等） 脓液及创伤感染分泌物标本 生殖道标本 组织标本 临床标本常规细菌学检验程序 细菌学鉴定方法 1、形态学检查 2、菌落的特点 3、生化试验 4、血清学试验 5、细菌抑菌试验 6、分子生物学检测 7、噬菌体分型试验 8、动物试验 细菌学检验报告原则 分级报告 药物敏感报告 常见病原菌 血液标本中常见的病原体 血标本的采集： 采血量 血液量每增加1ml，? 阳性率就增加3%～5% 血量2ml增加到20ml时，血培养的阳性率就增加30%～50% 儿童抽血量为1～3ml，成人抽血量3-5ml。 血液和肉汤的比例一般推荐为1：5～1：10标本量大于1ml，细菌量也增加，对于感染的儿童每毫升血液比成人有更多的微生物。 血标本的采集 3、亚急性心内膜炎：24h内在三个不同部位采集3次血标本，两次间隔不少于15分钟，如培养阴性，就再采3次血标本。 4、急性脓毒血症：在10分钟内在不同部位采2～3次血标本。 血标本的采集 5、不明原因的发烧：从不同部位采血2～3次，2次间隔至少1小时。如培养阴性，就再采2～3次。6、患者已使用抗生素：可适当停药，并用含中和抗生素的血培养瓶。7、无菌采取血液和骨髓液用不含防腐剂的肝素抗凝，然后用Hanks液作适当稀释。 培养基：血液增菌液。 血液标本的病原菌的检验 血液细菌学检查 血或骨髓培养应孵育7天，此期间如发现细菌生长，经涂片革兰染色镜检后立即口头报告“疑有革兰x性菌生长“，此后约6～8h应报告药敏试验初步结果，次日发出正式细菌鉴定及药敏报告。培养3天无菌生长通知医生，7天无菌生长正式发出阴性报告。 二、脑脊液标本 1、腰穿法采集脑脊液3—5ml打入血培养瓶中或放入无菌试管中，立即送检；2、注意保温，不可置冰箱保存，因为会使病原菌死亡，尤其是脑膜炎奈瑟氏菌、肺炎链球菌及流感嗜血杆菌；3、脑脓肿吸出物尚须检测厌氧菌和寄生虫 培养基选择：普通血培养瓶、厌氧血培养瓶、血平皿、中国蓝平皿、流感嗜血杆菌平皿。 细菌学检查 ? ? 1．涂片检查：革兰染色：查找一般细菌，尤其脑膜炎奈瑟菌、肺炎链球菌和 链球菌多见。抗酸染色：查找结核分枝杆菌。 墨汁染色：查找新型隐球菌。 ? 2．细菌培养：脑脊髓液培养多数需3～4天，在此期间如有细菌生长，需经鉴定报告“××菌“，同时报告药敏试验结果。 三、尿液标本 无菌采集中段尿 如考虑厌氧菌感染，采取膀胱穿刺法采集标本。 排尿困难者考虑导尿采集标本。 尿液标本的采集 1、一般原则 ?通