罗布麻纤维抗菌机理研究.pdfVIP

No．3 OFINSPECTIONAND 2009年第3期V01．19 检验检疫学刊JOURNAL QUARANTINE 信号的强度。同时探针上还连接有MGB(Minor检出8个阳性样品，说明本方法具有更高的灵敏性 Groove Binder)修饰基团，可以将探针的Tm值提高并具备在检验检疫中实际应用的价值。 参考文献 100C左右。因此，MGB探针可以比普通TaqMan探 针设计得更短，既降低了合成成本，也使得探针设 [1]张嫒，童睿，郑秋月，等．PCR和实时荧光PCR方法检测华 计的成功率大为提高。 支睾吸虫[J]．寄生虫病与感染性疾病，2008，6(1)：9—11． [2]索化夷，汤承，岳华，等．实时荧光定量TaqManPCR检测鸭 利用重组质粒制备标准品，不仅因为菌种容易 瘟病毒方法的建立[J]．中国预防兽医学报，2006，28(3)： 保存、标准品容易获得，还可将其作为阳性对照并 ‘332～335． 指示PCR试剂是否有效，结果相对稳定。本实验阳 [3]王金成，季镭，杨秀丽，等．松材线虫TaqMan探针实时荧光 性质控标准品浓度在1．32×102～5．15×107拷贝／ 止，据此制作的标准曲线所代表的初始模板浓度与 [4]王明旭，朱水芳，罗宽，等．松材线虫rDNAITS2的TaqMan ct值之间呈较好的线性关系，相关系数为0．9984， ～85． PCR的扩增效率达到95％，组内重复和组间重复实 [5]葛建军，曹爱新，刘先宝，等．应用TaqManMGB探针进行松 验的ct值的变异控制在统计学范围之内，重复性 材线虫的实时荧光定量检测技术研究[J]．植物病理学报， 好，标准曲线的线性范围为102～107拷贝／此，说明 2005，35(6)：52～58． 本方法具有稳定性好、重复性好、线性范围宽、扩增 [6]孔繁德，徐淑菲，彭海滨，等．沙门菌实时荧光定量PCR检 测试剂盒的研制与应用[J]．中国国境卫生检疫杂志，2006， 效率高等特点。特异性实验结果显示，本研究设计 29：111—114． 的引物和探针具有高度的特异性，仅能从参与实验 [7]王贵强，李树清，张子群，等．实时荧光PCR检测牛边缘无 的旋毛虫隔离种DNA检测到荧光信号并在整个 浆体方法的建立及应用[J]．中国预防兽医学报，2007，29 PCR进程中形成平滑完整的扩增曲线，其它寄生虫 (8)：634—636． 和健康宿主的DNA在实验中则是杂乱无章的信号； [8]罗勇军，刘昕．实时荧光定量PCR标准品的制备及应用[J]． 灵敏性实验结果表明，本方法最低能检测出体系中 重庆医学，2005，34(3)：414—415． [9]李维彬，蒋正军，王玉炯，等．非洲猪瘟病毒TaqMan探针实 2个数量级的拷贝数和相当于百万分之一条旋毛虫 时荧光定量PCR检测方法的建立[J]．宁夏大学学报，2007， 的DNA。 28(1)：56～59． 用建立的实时荧光PCR检测人工感染猪旋毛 [10]杨发龙，贾文祥，谢轶，等．鸭疱疹病毒1型实时荧光定量 虫小鼠的肌肉，结果在感染14d后，无论高