新 疆不同地区牛粪源大肠杆菌O157H7分离鉴定及毒性研究分析.pdfVIP

新疆普通高校重点学科基础兽医学资助 的全部研究成果； 课题主持人：苏战强讲师 (新疆农业大学动物医学学院) 新疆维吾尔自治区自然科学基金资助项目资助 (项目号2014211A028)的部分研究成果 课题主持人：苏战强讲师 (新疆农业大学动物医学学院) 万方数据 新疆不同地区牛粪源大肠杆菌0157：H7分离 鉴定及毒性研究 摘要 肠出血性大肠杆菌能引起人的出血性腹泻和肠炎，以0157：H7血清型为代表菌株。 为了解新疆三个地区不同牛场大肠杆菌0157：H7的流行情况，对新疆伊犁、塔城、阿克 苏三个地区牛场采集的粪样进行大肠杆菌0157：H7的分离鉴定。样品经大肠杆菌肉汤培 养基增菌、免疫磁珠富集后，用山梨醇麦康凯平板和4．甲基伞形酮葡糖苷酸培养基进行 初步筛选，选用菌体O抗原基因和鞭毛H抗原基因对筛选后疑似大肠杆菌0157：H7菌 株进行PCR扩增，同时结合生化方法进行符合性试验。最终从新疆三个地区不同牛场 究结果表明，部分被检牛场存在被大肠杆菌0157：H7威胁的可能性。本研究以大肠杆菌 0157：H7的O抗原基因、鞭毛H抗原基因、黏附素基因和志贺样毒素为特异基因片段 为扩增对象，目的片段选取片段大小不同的5对引物，通过反复摸索反应温度，时间等 一系列反应参数后，确定了最佳反应体系。本试验用多重PCR方法检测大肠杆菌 0157：H7是可行的。通过对感染大肠杆菌0157：H7志贺样毒素小鼠临床反应、致死率、 血液生化指标的观察及检测，初步分析该病原菌所携带志贺样毒素的致病性和致病机 制。本试验研究结果感染大肠杆菌0157：H7小鼠精神沉郁、腹痛、反应迟钝等症状明显， 少数伴有轻度的腹泻症状，尿液呈明显的黄色。病理剖检可见小肠部位充血、出血严重、 肠内容物有无色透明粘液。血液常规检测携带大肠杆菌0157：H7志贺样毒素小鼠白细胞 数、粒细胞数均有明显降低的趋势，与空白对照组小鼠差异极显著(P0．01)；未携 带大肠杆菌0157：H7志贺样毒素小鼠淋巴细胞数相比空白对照组小鼠差异显著(P O．05)，携带大肠杆菌0157：H7志贺样毒素小鼠淋巴细胞数与空白对照组小鼠相比差异 志贺样毒素小鼠的红细胞平均体积间有差异，且差异显著(尸O．05)。 关键词：大肠杆菌0157：H7；免疫磁珠：毒力基因；多重PCR；白细胞数 万方数据 To Detectthe Ecoli StudiesinDifferent Dung O157：H7and Toxicity ot Xtnllang Reg’’1。17‘‘iangKeglons Abstract EcoliO157causes diarrheaand 157：H7 as swains．To hemorrhagic enteritis，Oserotyperepresentative detectthe Ecoli0157：H7in andAkesu the aboutE dung Ili，Tacheng ofXinjiang，Understandprevalence coli0157：H7indifferentcattlesof ECbrothe