小鼠脾内注射日本血吸虫病患者尿液循环抗原制备单克隆抗体3.PDF

( ) 中国寄生虫学与寄生虫病杂志　1999; 17 3 ∶159～ 161 Ch inese Journal of Parasito logy and Parasitic D iseases 1·59 · 小鼠脾内注射 日本血吸虫病患者尿液循环 抗原制备单克隆抗体 吴琛耘　娄文娴　薛纯良 上海第二医科大学寄生虫学教研室　上海　200025 　　提要　 目的: 探讨用一种快速免疫方法制备抗人尿液日本血吸虫循环抗原的单克隆抗体。方法: 将 日本血吸 虫病患者尿液用 15% 三氯醋酸提取循环抗原后采用脾内直接注射法免疫 小鼠制备单克隆抗体。结果: 建 BALB c 立了2 株分泌抗人尿 日本血吸虫循环抗原的单克隆细胞株 2 6 及 2 11, 两者免疫球蛋白鉴定均属 类, E B IgM EL ISA ( ) 5 4 测得单抗对尿液循环抗原 , 效价分别为 2. 56 ×10 和 6. 4 ×10 。琼脂双扩散试验显示 2 株单抗与正常 IHU CA g 人尿三氯醋酸提取物均不能形成沉淀线, 而 2E 6 与日本血吸虫病患者尿液循环抗原能产生沉淀线。分别用 2B 11 和 2 6 腹水为捕捉抗体, 11 为酶标抗体检测 12 例急性血吸虫病患者尿液, 依次为 6 例和 3 例阳性, 8 例正常 E HR P H 人尿液均为阴性。结论: 用血吸虫病患者尿液提取的循环抗原经脾脏注射免疫 小鼠制备单克隆抗体用于 BALB c 检测 日本血吸虫病患者尿液中循环抗原是可行的。 关键词　 日本血吸虫　脾内注射　尿液循环抗原　单克隆抗体 　　 日本血吸虫寄生于宿主门脉肠系膜静脉系统, 后, 4 000 g 离心 30 m in , 弃去沉淀, 上清液流水透析 其成虫排出的虫卵多沉积于患者肝脏及肠组织中。 过夜, 经超滤后冰冻抽干, 为 阳性尿液循环抗原 虫体的代谢分泌物及虫卵内毛蚴的分泌物存在于患 ( ) , 4 ℃保存, 备用。正常尿样以同方法提 IHU CA g 者的血液及尿液中, 成为循环抗原(circu lating an ti 取, 制备对照抗原( ) 。 N HU CA g gen , CA g) [ 1 ]。 目前, 检测患者血液中的抗体及抗原 2　兔尿循环抗原　 为日本血吸虫感染兔 IRU CA g 已取得了较好的进展, 而检测尿液中的循环抗原正 尿循环抗原, 与 及 处理方法 IHU CA g N HU CA g 日益受到国内外学者的关注,