纳米尺度和单分子水平上的化学生物学研究-大学化学.pdfVIP

第 19 卷 　第 1 期 大学化学 2004 年 2 月 纳米尺度和单分子水平上的化学生物学研究 李军 　王柯敏 　何晓晓 　唐志文 (湖南大学化学生物传感与计量学国家重点实验室 ,生命科学与技术研究院 ,化学化工学院　长沙 410082) 　　摘要 　化学生物学是化学与生命科学交叉融合的新兴学科 。在纳米尺度和单分子水平上原 位 、活体 、实时研究化学生物信息是化学生物学的重要研究方向。分析化学工作者利用纳米技术 和分子生物学的最新研究成果 ,在这一研究方向取得了重要进展 ,为化学生物学的发展做出了积 极贡献 。本文重点介绍实验室利用生物亲和性核壳纳米颗粒和分子信标核酸探针所发展的一系 列原位 、活体 、实时检测 、分离生命体内痕量活性物质的新原理 、新技术及其在化学生物学研究中 的应用 。 1 　引言 　　生命体内痕量活性物质的分析与检测对获取生命过程中的化学与生物信息、了解生物分 子及其结构与功能的关系 、阐释生命活动的机理以及疾病的诊断都具有重要的意义 ,也是化学 生物学的重要研究内容 。随着生命科学的迅速发展 ,人们对生命现象的观察和研究已深入到 单细胞 、单分子和核酸的单个碱基这样的层次 ,迫切需要在更加微观的尺度上原位 、活体 、实时 地获取相关生物化学信息 ,许多传统的、常规的生物分析化学方法与手段面临极大的挑战 。解 决这个问题的一种方式就是把化学生物传感器更加微型化 ,这方面的努力已有一系列重要进 展 ,1992 年著名期刊 Science 报道了这些进展中的一个标志性成果 ———美国密西根大学 Tan 和 Kopelman 发展的第一个亚微米尺度的光纤 p H 荧光传感器[ 1] 。它在响应时间、检测空间以及 超高灵敏度等方面都较传统的光纤 p H 荧光传感器有显著改善 。将其插入兔胚胎中 ,活体观 察了胚胎发育过程中p H 的变化而不影响其生理活动 。在人们的不懈努力下 ,亚微米光纤化 学生物荧光传感器的检测对象也有了较大的发展 , 由p H 拓展到 Ca2 + 、Na + 、K+ 、O2 、NO 、谷氨 酸 、葡萄糖和 DNA 等重要的化学与生物参量[2 ] 。但是 ,将这种荧光传感探针的尺寸向纳米尺 度发展的努力遇到了严峻的挑战 ,这主要是由于 目前的微制造技术还不具备开发纳米尺度光 纤传感探针的能力 。 　　纳米技术与分子生物学的迅速发展为分析化学工作者敞开了一扇新的大门。基于生物纳 米颗粒和分子信标核酸探针的生物分析化学新原理 、新方法与新技术近年得到了很大的发 展[3 ] ,使人能够获取纳米尺度甚至单分子水平上的相关生物化学信息 。分析化学工作者比以 李军 : 湖南大学副教授 。 王柯敏 : 湖南大学教授 ,博士生导师 ,化学生物传感与计量学国家重点实验室主任 何晓晓 : 湖南大学讲师 。 唐志文 : 湖南大学博士生 。 10 往任何时候都更加深入地融合到生命科学领域 。毫无疑问,纳米尺度和单分子水平上的化学 生物学研究必将成为传统分析化学学科向前发展的新的充满活力的生长点 。本文通过介绍本 实验室的一些工作以展示这一前沿研究领域的相关发展 。 2 　基于生物纳米颗粒的生物分析化学 　　纳米颗粒是一种尺度为纳米量级的超细颗粒[4 ,5 ] ,能为制造超微生物化学传感器提供新 材料 。本实验室发展了一种在温和条件下制备生物纳米颗粒的新方法[6 ,7 ] , 研制出一系列由 功能性内核 、可生物修饰的外壳以及修饰在外壳表面的生物功能分子 3 部分构成的新型核壳 生物纳米颗粒材料 。 2. 1 　核壳生物纳米颗粒的特性 　　制备核壳生物纳米颗粒主要包括以下 3 个关键步骤[8～10 ] :首先利用微乳液法控制水核的 尺寸 ,从而控制纳米微粒粒径的大小和分布 ;其次采用正硅酸乙酯水解的方法实现在纳米颗粒 表面修饰上二氧化硅外壳 ;最后通过物理吸附和化学修饰的方法在外壳表面修饰生物功能分 子 。这种纳米颗粒具有如下特性 : ( ) [ 11] 　　 1 生物安全性