产高纯度l-乳酸大肠杆菌基因工程菌的初步研究 construction of recombinant e. coil strain for producing high-purity l-lactate.pdfVIP

现代食品科技 Modern Food Science and Technology 2010, Vol.26, No.2 产高纯度L-乳酸大肠杆菌基因工程菌的初步研究 杨登峰，潘丽霞，关妮，黄日波 （广西科学院国家非粮生物质能源工程技术研究中心，广西南宁 530003） 摘要：本文以鼠李糖乳杆菌（Lactobacillus rhamnosus ）基因组为模板，扩增出 L-乳酸脱氢酶基因 ldh，将其连接到表达载体pSE380 ， 转化到 D-乳酸脱氢酶及丙酮酸甲酸裂解酶双缺失的大肠杆菌FMJ 144 中，摇瓶发酵得到3.5 g/L 的高纯度为99%的L-乳酸。 关键词：L-乳酸；鼠李糖乳杆菌；L-乳酸脱氢酶基因 文章篇号:1673-9078(2010)2-126-128 Construction of Recombinant E. coli. Strain for Producing High-purity L-Lactate YANG Deng-feng, PAN Li-xia, GUAN Ni , HUANG Ri-bo (Industrial Biotechnology Research Center, Guangxi Academy of Sciences, Nanning 530003, China) Abstract: L-lactate dehydrogenase gene was amplified from the genome of Lactobacillus rhamnosus, and ligated into the expression vector pSE380. Then the recombinant plasmid was transformed into the double mutant e.coli strain FMJ 144. By the flask fermentation, 3.5g/liter L-lactate acid was achieved with 99% optical purity. Key words: L-lactic acid; Lactobacillus rhamnosus; L-lactate dehydrogenase gene L-乳酸经过反应可聚合生成直链或环状聚乳酸， 要为乳腈法[5-6]，合成乳酸的原料以丙烯腈合成中的副 聚 L-乳酸是无毒的高分子化合物，具有生物相溶性 产物乳腈为主。回收粗乳腈，进行蒸馏提纯后，加入 (biocompatibility)，在人体内能被分解成L-乳酸，被人 浓盐酸或浓硫酸水解生产乳酸，反应副产物为氨盐。 体代谢吸收，不引起变态反应。鉴于以上特性，聚 L- ⑵酶法：日本东京大学的木畸等人[7]研究了 2-氯丙酸 乳酸可用作许多产品的原料，如缓释胶囊制剂、生物 酶法转化生产乳酸的方法； [7] Hofvendahl 等 也曾报道了 植片、外科手术用的缝合线。而且聚乳酸可被微生物 以丙酮酸为原料生产乳酸的另外一种方法。⑶微生物 完全降解为 CO 和 H O，因此可用于制造生物降解纤 发酵法：以农副产品为原料，通过微生物发酵生产制 2 2 维、降解塑料，替代现在广泛使用的 PVC、PP 类塑料 得光学纯的乳酸。在上述方法中，化学合成法合成的 制品，减少不可再生资源石油的使用，减少清理垃圾 乳酸大多是外消旋乳酸，即 DL-乳酸，所用原料有剧 的成本。正由于聚乳酸可以在自然界分解，这不仅消