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外源生长激素对运动大鼠循环ghrelin及IGF-I水平影响
外源生长激素对运动大鼠循环ghrelin及IGF-I水平影响摘要:观察了短期注射重组人生长激素(rhGH)对大鼠GH/IGF-I轴上相关物质的影响。方法:将32只SD雄性大鼠分为4组:对照组、运动组、GH组和GH+运动组,运动方式为游泳训练。在实验的最后一周给GH组和GH+运动组大鼠注射rhGH,持续7d,1次/d,注射剂量为100μg/只。检测大鼠血液GH、ghrelin和IGF-I浓度。结果:与对照组相比,短期注射rhGH后,大鼠血浆ghrlin浓度明显下降(P<0.01),血清IGF-I浓度显著上升(P<0.01),血液IGF-I/ghrelin比值明显增大。结论:1)短期注射rhGH使血浆ghrelin浓度降低,提示外源GH对ghrelin有负反馈调节作用;2)验证了前人的发现,使用外源GH可明显提升大鼠血清IGF-I水平。
关键词:生长激素;ghrelin;胰岛素样生长因子1(IGF-I);运动
中图分类号:G804.7 文献标识码:A 文章编号:1007-3612(2009)0l-0065-03
生长激素(GH)是一种由脑垂体嗜酸细胞产生和分泌的蛋白激素,它在人体的生长发育中起着重要作用。生长激素除促生长作用外,还具有减少脂肪量和增加瘦体重、增加肌肉体积、增强肌肉力量和有氧能力等功能,基于此原理,一些运动员使用外源GH来提高运动成绩。有研究报道表明GH能刺激肝脏胰岛素样生长因子1(IGF-I)的分泌,而对ghrelin的分泌有负反馈作用。相关的研究还表明。血液IGF-I水平与ghrelin水平负相关,而在运动中,外源GH是否还导致GH轴的上述物质的变化现在还不清楚。据此,本研究以大鼠游泳运动为运动模型,观察使用外源性生长激素后血液IGF-I和ghrelin水平的变化及后二者比值的变化,期望通过了解外源生长激素对运动大鼠GH轴上相关物质的影响,进一步了解生长激素在运动中的所起的作用。
1 材料和方法
1.1 实验动物 雄性Sprange-Dawley大鼠,32只,7周龄,体重150-180g。分笼饲养,每个鼠笼3-4只,自由饮食,国家标准啮齿类动物常规饲料喂养。动物饲养环境温度23±2℃,湿度40%~60%,自然昼夜节律变化光照。
1.2 动物分组、运动模型及药物方案 大鼠随机分为4组:安静对照组(C组)8只;运动组(EP组)8只;药物对照组(GH组)8只;药物运动组(GH+EP组)8只。运动方案:c组正常笼内生活状态,不施加运动负荷;EP组每次游泳60min,每天一次,每周6d,训练8周,训练在玻璃水池中进行,水温(32±2)℃,水深超过两倍鼠长,每只动物约占350cm2的活动面积;GH组笼养,不运动,于最后一周注射重组人生长激素(recom-binant human GH,rhGH);GH+EP组运动方案同EP组,于最后一周注射rhGH。
药物方案:在最后一周,GH组和GH+EP组大鼠大腿内侧皮下注射rhGH,1次/d,每次100μg/只(参考Matthias等的研究报告),注射时间为早上8时,连续7 d,c组和EP注射同等剂量的生理盐水。GH+EP组和EP注射后休息10min,然后运动,末次运动后即刻取样。GH组和c组末次注射后休息70 min,然后取样。
1.3 血样的采集与处理 用2%的戊巴比妥钠腹腔注射麻醉大鼠(40mg/kg体重)。待大鼠麻醉后,迅速自腹部向上剪开胸腔,用镊子固定。用10mL针管穿刺左心室抽血,然后取2mL注入含置于含有10%EDTA-Na(2mg)和抑肽酶(140μg)试管中混匀,4℃下离心(3000r/min)15min,分离血浆,-20℃保存待测,用于分析ghrelin;余血注入10mL的玻璃离心管,室温下静置3h,常规分离血清,-20℃保存待测。用于分析IGF-I。
1.4 指标测定 血清GH浓度的测定,采用放射免疫法(RIA)测定,试剂盒购自北京北方生物技术研究所。血清IGF-I和血浆ghrelin浓度的测定,均采用双抗夹心ELISA法,大鼠IGF-IELIsA试剂盒购自上海朗卡公司,ghrelin ELISA试剂盒购自康肽生物科技(北京)有限公司。
1.5 数据分析 各组用数据结果用平均值±标准差(M±SD)表示,用统计软件SPSS11.0进行分析处理,采用方差分析和多重比较的统计学方法,P<0.05代表显著性差异。P<0.01代表极显著性差异。
2 结果
2.1
血清GH浓度 末次运动后即刻,EP组血清GH浓度与对照组相比显著升高(P<0.05);GH组和GH+EH血清GH浓度与对照组相比增高近100倍(P<0.01)(表1)。
2.2 血浆ghrelin浓度 EP组与c组相比,ghr
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