两种粗提纯法对纤溶酶纯化效果的比较研究 comparative study on purification effect of fibrinolytic enzyme by two kinds of crude purification method.pdfVIP

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2017-11-22 发布于上海
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两种粗提纯法对纤溶酶纯化效果的比较研究 comparative study on purification effect of fibrinolytic enzyme by two kinds of crude purification method.pdf

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两种粗提纯法对纤溶酶纯化效果的比较研究 comparative study on purification effect of fibrinolytic enzyme by two kinds of crude purification method

2014年第33卷第9期研究报告中国酿造总第271期 ·17· 两种粗提纯法对纤溶酶纯化效果的比较研究温健，潘师翰，焉凯舟，郑鑫，梁智群宰 (广西大学生命科学与技术学院，广西南宁530004) 摘要：采用硫酸铵盐析法及乙醇沉淀法对海洋枯草芽孢杆菌纤溶酶的纯化效果进行比较研究，得到的最佳纯化方案为：取一定体积的纤溶酶发酵液进行预处理，再进行分段盐析及分级沉淀，在分段盐析中，30％和70％饱和度的硫酸铵分别用于去除杂蛋白和沉淀纤溶酶，最后进行碱处理及超滤除盐：在分级沉淀中，最佳乙醇沉淀时间为1．5h，去除杂蛋白和沉淀纤溶酶的乙醇体积比分别为25％和165％，最后将两种方法得到的粗提液进行冷冻干燥，硫酸铵法的酶活回收率为83．52％，纯化倍数为1．42，冻干粉得率为4．812 g／L，单位酶活为76755．82 1 190．57 1U／g；乙醇纯沉淀法的酶活回收率为89．7％，纯化倍数为1．72，冻干粉得率为7．61g／L，单位酶活为137 IU／g，该结果表明乙醇沉淀法对纤溶酶的粗提效果要优于硫酸铵盐析法。关键词：枯草芽孢杆菌；纤溶酶；硫酸铵盐析；乙醇沉淀；纯化中图分类号：Q814．1 文献标识码：A 文章编号：0254—5071(2014)09—0017—05 doi：10．11882／j．issn．0254—5071．2014．09．005 on effect twokinds method ofcrude Comparativestudyptkrificationoffibrinolytieenzymeby purification WEN Jian，PANShihan，YANKaizhou，ZHENGXin，LIANG Zhiqun+ ofLifeScienceand (College Technology,GuangxiUniversity,Nanning53004,ch／na) Absnaet：Inthis sulfate andethanol methodwere to the effectoffibri- appfied paper,ammoniumprecipitation precipitation investigatepurification marineBacillus the conditionswere fermentationbrothoffibri- nolyticenzyme subtilis,and producedby optimalpurification determined．