东方百合转基因受体系统的建立.pdfVIP

分子植物育种，2010年，第8卷，第5期，第991—996页 MolecularPlantBreeding，2010，Vo1．8，No．5，991—996 技术改进 UpgradedTechnology 东方百合转基因受体系统的建立 刘光欣 胡凤荣 张睿婧 施季森 南京林业大学，南京，210037 通讯作者，hufengrong2003@sina．com 摘 要 本研究以东方百合 索‘邦 ’(LiliumOrientalS‘orbonne’)鳞片为外植体获得试管苗，取试管苗鳞片为 材料研究细胞分裂素、生长素、培养基、pH值、蔗糖和抗生素等因素对百合试管苗鳞片不定芽分化的影响，建 立了东方百合转基因受体系统。结果表 明，东方百合试管苗鳞片适宜的再生系统为MS+0．2mg／L6-BA+ 0．5mg／L2,4一D+20g／L的蔗糖，pH5．8，预培养2d。在抗生素敏感性试验中发现，头孢霉素(Cef)在400mg／L 浓度 以下对百合试管苗鳞片不定芽分化没有明显影响，但是随着卡那霉素(Krn)浓度的升高，不定芽的诱导 频率明显降低。本实验还研究了卡那霉素(Km)对试管苗鳞茎生根能力的影响，发现Km在 100mg／L以上时 能够有效抑制试管苗生根。因此，可 以通过在转基因植株的生根培养基中添加一定浓度 的Km，来初步检测 转基因植株的真伪。 关键词 东方百合，鳞片，受体系统 EstablishmentofaTransgenicAcceptorSystem forOrientallily LiuGuangxin HuFengrong ZhangRuijing ShiJisen NanjingForestryUniversity,Nanjing，210037 Correspondingauthor,hufengrong2003@sina．com DOI：10．3969／mpb．008．000991 Abstract In thisstudY，wesutdiedtheeffectsofvariousfactorsonadventitiousbudsinduction，suchascy- tokines，auxin，solidmedia，pH，sugarandinorganicsaltsbyemployingbulbscalesofOrientallilyasexplants．The resultsindicatedthatthebestsystem forsorbonn eadventitionsbulbinductionwasM saddedwith0．2mg／L6-BA， 0．5mg／L2,4一D，20g／Lsugarandpre—culutredofr2days．Theeffectofkanamycin(Krn)andcefotaxime(Cef)was alsostudied．Theresultsindicatedthatcefwithconcentrationlessthan400megLhadnoeffecttoadventitiousbuds induction．ButwiththerisingofKm concentration，thepercentageofbudsinductionwassignificantlydecreased． Effectsofthekanamycintoinvitroplantletrootingwasalsosutdied．Theresultsshowedthatkanamycincouldre— ducetheplantletrootingefficiently．Soitcouldbeusedtoidentifytheauthenticityofthertna sgenicplantby addingKm totheculturemedium． Keywords Lilium oriental，Bulbscales，Acceptorsystem 1983年第一例转基因植株获得成功，至今全球 随着转基因技术在作物 中的成功应用，转基因 已有 35个科，120种植物转基因成功，已有 30个国 花卉也逐渐进入市场(Daveyeta1．，2007；Aanhaneeta1．， 家先后批准了三千多例转基因植物进入 田间试验， 1995；Lueta1．，1991；M eyereta1．，1987；Robinsonet 主要集中在玉米、油菜等作物品种 中，其中有五十多 a1．，1993；Vaneta1．，1988)。自第一株转基因淡紫色康 个农作物转基因的品种投入商业化生