生物课件】分子生物学实验.pptVIP

实 验 内 溶 绪论—分子生物学实验的诞生和发展 分子生物学实验的基本知识简介 实验规范训练、实验准备 大肠杆菌感受态细胞的制备及质粒DNA的转化 PCR基因扩增及扩增产物的回收(核酸的回收) 琼脂糖凝胶电泳 质粒DNA的提取及其定性定量分析 核酸的定量 DNA重组－酶切连接、转化、筛选 外源基因在大肠杆菌中的诱导表达及检测 免疫印迹 哺乳动物基因组DNA的提取及其定性定量分析 植物总RNA的提取及其定性定量分析 演示：Southern、DNA序列测定、RT－PCR及mRNA差异显示 设计实验及其实施 实 验 安 排 设计实验一: 原核生物的酶的克隆和原核表达 限定目标：目的基因－原核生物的酶、表达载体－pET21a 或 pETBlue－2 限制性内切酶：BamHⅠ和 HindⅢ 要求： 找到具体某一原核生物的某一编码基因的全序列利用分析件进行目的基因内部限制性内切酶的酶切分析及5’和3’末端引物的设计提交具体的实验方案（从提取全基因组到目的基因的重组、表达及活性分析） 第八个实验周前必须把详细的实验设计交给指导教师 第八个实验周指导教师组织全班同学讨论每个实验设计，确定两个最好的实验设计在全班进行具体的实验实践 设计实验二: 小麦看家基因的克隆 限定目标：小麦看家基因、表达载体－pET21a 或 pETBlue－2 限制性内切酶：BamHⅠ和 HindⅢ 材