间充质干细胞微泡的组织修复及其机制的研究进展.PDFVIP

中华危重病急救医学 2014 年11 月第26 卷第11 期　Chin Crit Care Med，November 2014 ，Vol.26 ，No.11 · 845 · · 综述· 间充质干细胞微泡的组织修复及其机制的研究进展 组织修复是危重病急救医学的重要内容。间充质干细 织修复的EV 主要是MSC 来源的外来体及MV ，在已发表的 胞（MSC ）是一种起源于中胚层，具有自我更新和多向分化 文献中多将两者统称为“MV”。 潜能的干细胞。在不同诱因刺激下，MSC 可分化为骨细胞、 2 MV 的提取 软骨细胞、脂肪细胞等中胚层细胞，也可越过胚层界限向外 MV 的提取方法主要包括离心法、微量过滤法、磁珠分 胚层的神经细胞、神经胶质细胞以及内胚层的肝卵圆细胞分 选法、微流体法、试剂盒提取法5 种。 化［1］。MSC 主要存在于骨髓中，同时存在于脂肪、肌肉、皮肤、 2.1 离心法 ［2 ］ 脐带、胎盘等多种组织中 ，具有易获得、易培养、遗传学稳 2.1.1 差速离心法：差速离心法是目前用于提取MV 最常用 ［1-3］ 定、使用不存在伦理道德问题等特点 。MSC 免疫原性低， 的方法。尽管各实验室流程不尽一致，但主要步骤基本相 ［3 ］ 具备独特的免疫调节能力，能够“归巢”至损伤组织等 ，因 同：低速离心（300 ×g ，10 min ）除去死亡细胞及大的凋亡碎 而在创伤修复、组织功能再生与重建、免疫调节与治疗等领 片；高速离心（各实验室不同，1 000 ～20 000 ×g ）除去大的 ［4-6 ］ 域被广泛应用 。既往的观点认为，MSC 主要通过定向分 囊泡及碎片；超速离心（100 000 ×g ）沉淀MV 。如需得到 ［7-11 ］ 化、旁分泌途径分泌多种细胞因子等参与组织修复 。近 纯度更高的MV ，可将MV 沉淀再次超速离心（100 000 ×g ） 年来的研究提示，MSC 也可能通过释放胞外囊泡（EV ）参与 1 次。应用差速离心法分离MV 过程中，一些蛋白物质、凋 细胞增殖及凋亡、血管生成、免疫调节等环节，从而发挥组织 亡小体、核小体碎片会随MV 沉淀在一起，导致MV 的纯度 修复作用［12-13］，是目前干细胞治疗在再生医学领域的研究 降低。同时各实验室间离心参数不同，如离心时间、相对离 热点。 心力、温度、离心机转子性能等因素均会影响MV 的分离效 ［14］ 1 间充质干细胞微泡（MSC-MV ）的概念 率 。此外，高速离心会导致细胞的破裂及活化，造成MV 细胞能够释放多种类型的囊泡，统称为EV ，EV 主要包 的“人为”释放。 ［14］ 括外来体、微泡（MV ）及凋亡小体3 种 。 2.1.