仿生技术构建小口径人造血管-生物通.PDF

中国生物工程杂志　ＣｈｉｎａＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２００９，２９（１０）：８１～８６ 仿生技术构建小口径人造血管  韩本松　范存义 　张　菁　薛　锋 （上海市第六人民医院奉贤分院　上海　２０１４００） 摘要　目的：研究以改性猪小肠粘膜下层组织（ＳＩＳ）为支架，利用仿生技术构建小口径人造血管 的可行性。方法：自犬隐动脉分离出血管内皮细胞和平滑肌细胞，与胶原蛋白凝胶均匀混合，分 别种植于改性ＳＩＳ膜表面，制成３ｍｍ仿生三层人造血管为实验组；制成单层人造血管为对照组， 分别植入修复１５例犬双侧股动脉缺损，术后进行彩超、组织学检测和电镜检测鉴定。结果：植入 １２周，１４个仿生人造血管保持通畅，通畅率９３．３％，有血管样生物结构形成，管腔内壁有完整的 内皮覆盖，管壁中层见大量平滑肌细胞；对照组通畅率６０％，有少许内皮细胞覆盖。结论：仿生小 口径人造血管具有良好的血液相容性，并能在体内保持良好通畅性，修复动脉缺损效果满意。 关键词　仿生技术　人造血管　小肠粘膜下层组织 中图分类号　Ｑ８１９ 　　在组织缺血的短时间内快速修复血管缺损，又能形 机（美国 ＴＯＭＯＳ）。ＤＫＺ恒温箱（上海华岩仪器）。 成血管的永久替代，这是血管修复的最佳方法。随着血 ＬＯＧＩＱ９彩色超声诊断仪（美国ＧＥ）。ＺＣＡ２６０００型全 管外科的发展，寻找良好血管替代品一直是各国学者致 自动凝血分析仪（日本，东亚）。Ｉ型胶原酶、胰蛋白酶、 ［１～３］ 磷酸盐缓冲液（Ｓｉｇｍａ公司）；肝素、三硝酸甘油（上海三 力的焦点 。目前常用自体静脉移植，中短期效果尚 浦化工有限公司）， 型胶原蛋白（四川铭让生物科技 可，但有研究表明，血流扩张力可造成股静脉管壁增厚， Ⅰ 管腔狭窄导致栓塞［４］。由抗凝改性后的高分子材料制成 有限公司）。ＬＺＬ１２型手术显微镜（镇江中天光学仪器 的血管，早期可保持良好通畅，但易老化退变，形成血栓 有限责任公司）。２１６Ａ高速台式离心机 （美 国 ［５］ ＴＯＭＯＳ）。 甚至断裂，不能保持长久通畅 。组织工程学使体外构 建具有生物活性，且结构、功能与自体血管类似的人造血 １．２　ＳＩＳ膜制备、改性 管成为可能，但仍面临许多问题，为了制作能长期保持通 　　空肠取自封闭饲养猪，制备 ＳＩＳ膜，对 ＳＩＳ膜进行 ［８］ 畅的组织工程血管，许多研究均需至少８周，无法满足临 抗凝改性 ，真空干燥待用。 ［６］ １．３　动物实验 床治疗需要 。另外，有实验表明，植入裸鼠体内的 ＰＧＡＳＭＣ复合支架，基本上处于静态环境中，缺少力学 　　取纯种成年犬（清洁级）１５只，行２．５％硫喷妥钠 ［７］ 注射液（０．６ｍｌ／ｋｇ）静脉全身麻醉。 刺激，平滑肌细胞增殖较弱而影响血管壁张力 。本课 题应用仿生技术、以改性ＳＩＳ构建小口径人造血管，并对 １．３．１血管细胞分离　切取隐动脉 １０ｃｍ，洗净，注入 修复血管缺损的可行性进行了研究。 ３７℃ 预热的０．１％Ｉ型胶原酶，放入装有磷酸盐缓冲液 （ＰＢＳ）的试管内，在３７℃水浴锅内孵育１０ｍｉｎ，将消化 １　材料与方法 液收入离心管内，加入１ｍｌ小牛血清中止消化，离心１０ １．１　材料与仪器