单克隆抗体杂交瘤细胞小鼠骨髓瘤细胞.PPTVIP

生物膜系统及细胞工程 一、生物膜系统 生物膜的组成：细胞膜，核膜以及由膜围成的细胞器组成的连续统一的膜系统。 生物膜的结构：蛋白质＋脂质＋多糖 功能：均具有一定的流动性及选择透过性 作用：物质运输、信息传递、能量转变、细胞识别 分泌蛋白的合成及分泌过程 二、细胞的全能性 三-1、 植物组织培养 三-1、植物组织培养 1、植物组织培养过程 三-2、动物细胞培养 植物组织培养和动物细胞培养的比较 四-2、动物细胞融合 主要用于疾病的诊断、治疗和预防。 若在单抗上带上抗癌药物制成“生物导弹”，将药物定向带到癌细胞所在部位，既消灭了癌细胞又不会伤害健康细胞。 特点：与常规抗体相比，具有特异性强、灵敏度高、化学性质单一的优点。 * 复习15 1、直接联系的膜： 2、间接联系的膜 内质网 高尔基体 细胞膜 小泡 小泡 膜的转变依赖于膜的一定的流动性 核膜 内质网 细胞膜 同位素标记法：32P标记磷脂→内质网→其它膜结构 突触小泡、分泌小泡、吞噬小泡 验证膜具有连续性： 氨基酸 核糖体 内质网 高尔基体 细胞膜 合成翻译 未成熟的Pr 加工运输 较成熟的Pr 加工包装 成熟的Pr 外排 具特定功能的Pr 体现了生物膜在功能上的连续性（明确分工，紧密联系） 跨膜层数？？？ 指应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法，通过某种工程学手段，在细胞整体水平或细胞器水平上，按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一门综合科学技术。 植物细胞工程 动物细胞工程 细胞工程 1.动物细胞培养 2.动物细胞融合 3.单克隆抗体 4.胚胎(分割)移植 5.核移植 1.植物组织培养 2.植物体细胞杂交 技术 手段 植物细胞工程 动物细胞工程 细胞工程 1.定义： 生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能的特性。 2.基础： 生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质，都有发育成为完整个体所必需的全部基因。 3.大小： 4.实现条件： 离体、一定的营养物质、激素、其他外界条件 受精卵 生殖细胞 体细胞 分化程度低的细胞﹥分化程度高的细胞 植物体细胞﹥动物体细胞（不易表达） 离体的植物器官、组织或细胞(高度分化了的) 愈伤组织(细胞团) 根,芽(胚状体) 植物体 外植体 脱分化 再分化 植物激素： 细胞分裂素、生长素 (离体的植物器官、组织或细胞) 脱分化 再分化 愈伤组织 根、芽 植物体 2、培养条件： 含有全部营养成分的培养基、一定的温度、空气、无菌环境、适合的PH、适合的光照等 外植体 举例： 花药离体培养 基因工程培育的抗棉铃虫的棉花植株 细胞工程中培育的“番茄-马铃薯”杂种植株 过程 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 细胞悬浮液 胰蛋白酶 （分解弹性纤维） 10代细胞 原代培养 50代细胞 传代培养 细胞株 无限传代 细胞系 遗传物质未改变 遗传物质改变 动物细胞培养 植物组织培养 应用 结果 培养基 项目 均需适宜的外界条件：PH,温度,营养及“无菌,无毒环境” 固体，营养物质，蔗糖、植物激素 培养成植株 液体，营养物质，葡萄糖、动物血清 培育成细胞系或细胞株 （1）生产蛋白质制品（如病毒疫苗、干扰素、 单克隆抗体、动物激素） （2）用于某些器官移植 （1）试管苗的快速繁殖 （2）无病毒植物的培育 （3）生产药物等 （4）人工种子 （5）转基因植物的培育 植物A细胞 植物B细胞 去壁 原生质体A 原生质体B 原生质体融合 融合细胞 再生壁 杂种细胞 脱分化 去壁的常用方法： 酶解法（纤维素酶、果胶酶等） 原生质体融合方法： 物理法：离心、振动、电刺激等 化学法：聚乙二醇（PEG） 四-1、植物体细胞杂交 融合成功的标志 人工诱导 筛选 愈伤组织 杂种植株 再分化 细胞A 细胞B 杂种细胞 物理法、化学法 灭活的仙台病毒 过程 诱导动物细胞融合与植物原生质体融合的原理和方法是否基本相同？ 制备单克隆抗体 不具有繁殖性但具有抗原性 主要用于制备单克隆抗体 获得杂种植株 用途 物理、化学方法（同左） 生物：灭活的病毒 物理（离心、振荡、电刺激） 化学（PEG） 诱导方法 使细胞分散后诱导细胞融合 去除细胞壁后诱导原生质体融合 细胞融合的方法 细胞膜的流动性 细胞膜的流动性、植物细胞全能性 原理 动物细胞融合 植物体细胞杂交 比较项目 植物体细胞杂交、动物细胞融合的比较 抗原 动物体内 刺激 效应B 抗体 特点：产量低、特异性差、纯度低、反应不够灵敏 五、单克隆抗体 1、常规抗体制备： 一个B淋巴细胞：只分泌一种特异性抗体 2、单克隆抗体 杂交瘤细