柔嫩艾美耳球虫广西南宁株的分离及鉴定.pdfVIP

· 168 · 疾病防治 中国畜牧兽医 2010年第 37卷第 9期 柔嫩艾美耳球虫广西南宁株的分离及鉴定 陈桂先l，韦园园 ，陈汉忠 ，周坚成 ，王柏生 ，白波 ，吴桂贤 ，韦荣莲 (1．广西大学动物科技学 院，南宁 530005；2．广西农业职业技术学院，南 宁 530007) 摘要 ：利用从南宁市郊养鸡场球虫病鸡粪便中收集 的球虫混合种卵囊感染小鸡 ，再应用单卵囊分离感染技术 ，从感染鸡 盲肠 中收集的卵囊分离纯化获得 1株纯种球虫，经鸡体传代增殖 ，对该虫株 的卵囊大小和卵形指数、潜在期、排卵高峰期、最短 孢子化时间、寄生部位 、致病性等指标进行观察和测定 。结果测得该虫株卵囊 的平均大小为 (25．743土1．94126)m×(21．4士 1．85985)“m，平均卵型指数为 1．2067_--4-0．07；潜在期为 140h；其排卵囊峰期在第 6～9天，最高峰在第 7天；最短孢子化时间 为 19h；寄生部位在盲肠 ；对两周龄 的艾维茵鸡 ，当使用 5×10 的孢子化卵囊感染剂量时死亡率为 7．5 。根据这些测定和 观察到的指标综合鉴定该分离株球虫为柔嫩艾美耳球虫 ，并命名为柔嫩艾美耳球虫广西南 宁株 (Eimeria．tenella—GXNN)，该 研究结果为进一步研究本地区鸡球虫病 的药物治疗和免疫预防等奠定了基础。 关键词 ：鸡 ；球 虫 ；分离 ；鉴定 中图分类号 ：$852．72 文献标识码 IA 文章编号 ：1671-7236(2010)090168一O4 鸡球虫病是 由艾美耳属球虫寄生在鸡肠道引起 培养箱 中培养至孢子化 ，直至球 虫卵囊孢子化达 的一种常见和危害严重的寄生虫病 ，全球每年因球 85 以上，置 4℃冰箱保存备用。采用离心沉淀法 虫病造成的损失达 80亿美元，中国每年仅用于治疗 将上述收集培养好并保存于4℃冰箱的球虫孢子化 鸡球虫病 的支出就达 25亿元人 民币 (古少鹏等 ， 混合卵囊反复离心、沉淀 ，洗净重铬酸钾，用麦克马 2008)。引起鸡球虫病的艾美耳属球虫种类多，公认 斯特计数板进行计数，然后感染 5只在无球虫环境 的有 7种 ，这些球虫往往呈混合感染，其中致病性较 下饲养至 3日龄 的艾维茵鸡 ，每只感染 10000个孢 强的是柔嫩艾美耳球虫 (Eimeriatenella)和毒害艾 子化卵囊，于感染后第 8天剖杀，取盲肠 ，在无菌接 美耳球虫 (Eimerianecatrix)。研究结果表 明，由于 种箱中用常规方法进行盲肠卵囊的收集，并于2．5 地理环境的不同，同种球虫的不 同地理株往往在一 的重铬酸钾溶液中3O℃恒温培养至孢子化 (培养期 些生物特性上会存在差异 (Adrian等，2002；陈兆国 间每天摇动平皿 3～4次)，4℃冰箱保存备用。 等 ，2001；Bhogal等，1992；陶建平等 ，2005；赵权等 ， 1．2 试验动物与饲养管理 艾维茵鸡苗购 自广西 2003)，而球虫的这些特性对球虫病 的治疗和免疫预 某有限责任公司。所有的试验鸡均于消毒好 的纸盒 防具有重要的意义。本研究试图应用单卵囊分离技 运 回，并分开饲养于 白制的经严格消毒的鸡笼内，试 术 ，从本地发病的鸡 中分离纯化柔嫩艾美耳球虫虫 验前用饱和盐水漂浮法检查小鸡粪便 ，均为阴性。 株 ，为进一步研究其生物学特性和开展鸡球虫病治 试验1l,x~饲料按照小鸡营养需求 自行配制 ，不添加 疗和免疫预防提供理论依据 。 任何抗球虫药的粉状饲料，并且所有饲料均于饲喂 1 材料与方法 前进行高压灭菌消毒。试验小鸡 自由饮水，自由 1．1 鸡球虫卵囊的收集 从广西南宁市郊 区有盲 采食。 肠球虫病的鸡场采集病鸡粪便 ，按常规方法收集球 1．3 试验用其他器材药品 琼脂粉 ，北京某生物技 虫卵囊 ，将收集到的混合卵囊置于 2．5 重铬