食品卫生微生物学检验蜡样芽胞杆菌检验.pdf

食品卫生微生物学检验 食品卫生微生物学检验 蜡样芽胞杆菌检验 蜡样芽胞杆菌检验 Microbiological examination of food hygiene Microbiological examination of food hygiene Examination of Bacillus cereus Examination of Bacillus cereus （GB/T 4789.14－××××） （GB/T 4789.14－××××） 背景 背景 蜡样芽胞杆菌为革兰氏阳性芽胞杆菌。在《伯杰 氏系统细菌学手册》第九版中，归为芽胞杆菌科 芽胞杆菌属，类似菌有炭疽芽胞杆菌、苏云金芽 胞杆菌以及巨大芽胞杆菌。 蜡样芽胞杆菌属于土壤细菌，在自然界广泛 分布于尘土、污水、河流和食品中，无论好氧、 厌氧都能增殖、生长成带芽胞的大杆菌，在蔬菜、 谷类等农作物和食品原料中主要以芽胞状态存在。 背景 背景 蜡样芽胞杆菌可引起食物中毒等食源性疾病。 国际上，早在1906年就有由该菌引起的病例 报道，目前全世界每年都有相当数量的病例发生。 在国内，首次报告是1973年南京某托儿所儿 童因进食泡饭引起呕吐型蜡样芽胞杆菌食物中 毒，至今除西藏外，每个省、自治区、直辖市已 经都有报，有些地区甚至占细菌性食物中毒的首 位。 背景 背景 蜡样芽胞杆菌食源性疾病临床表现有“腹泻型” 和“呕吐型”两种形式： “腹泻型”食源性疾病潜伏期为8h～16h，是 由于本菌在肠道内增殖过程中产生肠毒素引起 的，原因食品主要为肉类、肉汤和其它食物。 “呕吐型”食源性疾病潜伏期为1h～5h，是 由于人摄入本菌在食品中产生的毒素引起的，原 因食品主要为米饭类、面类（挂面、荞麦面饼） 等。 背景 背景 • 为了在食品中有效开展蜡样芽胞杆菌检测，以 保障食品安全，降低蜡样芽胞杆菌感染的风险， 防止食源性蜡样芽胞杆菌疾病的发生，我国在198 4年制定了《食品卫生微生物学检验 蜡样芽胞杆 菌检验》（GB/T 4789.14-1988）标准，该标准的 颁布为蜡样芽胞杆菌的规范检测，为蜡样芽胞杆 菌病的监测、预防、控制起到了重要的作用。 背景 背景 •在以后的二十年时间里，食品中蜡样芽胞 杆菌检测标准经过1994年、2003年二次修 订，但内容可以说完全与1984年版相同。 现行GB/T 4789.14-2003标准不足处 • 1. 对蜡样芽胞杆菌含量少于1000cfu/g的样品计数效 果差。 • 2.采用的36℃±1℃培养温度并非是蜡样芽胞杆菌最 适生长条件。 • 3.检验方法与现行的其它国家的标准存在一定差异。 重新修订的意义 （1）提高蜡样芽胞杆菌检出率 • 蜡样芽胞杆菌的最佳生长温度为30～32℃。 • 经标准修订协作组验证：蜡样芽胞杆菌在MYP培养基的 培养条件以30 ℃±1 ℃ 培养48h的生长率最高，平均生长 率达到了93.69%。其次为30 ℃±1℃ 培养24 h，平均生长 率为92.28%。生长率最低的培养条件为36 ℃±1 ℃ 培养2 4 h。平均生长率为82.32%。经统计学分析，30 ℃±1 ℃ 培养温度的生长率显著高于36 ℃±1 ℃(P﹤0.05），但在 培养温度相同的情况下，培育时间24h和48h蜡样芽胞杆菌 生长率无显著差异（P﹥0.05）。 表1 MYP培养条件选择结果 MYP平板计数结果 菌量 30 1 48h 36 1 24h 36 1 48h 30 ℃±1℃ 24h ℃± ℃ ℃± ℃ ℃± ℃ （cfu 比对单位 /皿） 计数结果 生长率 计数结果 生长率 计数结果 生长率 计数结果 生长率