唐古特白刺质膜荦犪＋／犎＋逆向转运蛋白基因的克隆与-草业学报.pdfVIP

第 卷 第 期 草 业 学 报 ２２ ４ １７９－１８６ 　 　 　 　 ， 　　 年 月 Ｖｏｌ．２２Ｎｏ．４ ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ ２０１３ ８ ＋ ＋ 唐古特白刺质膜 ／ 逆向转运 犖犪 犎 蛋白基因的克隆与表达分析 郑琳琳，张慧荣，贺龙梅，王迎春 （内蒙古大学生命科学学院 内蒙古自治区牧草与特色作物生物技术重点实验室，内蒙古 呼和浩特 ０１００２１） ＋ ＋ ＋ 摘要：土壤中过多的 会导致植物产生盐害，严重影响植物的生长和发育。质膜型 ／ 逆向转运蛋白 Ｎａ Ｎａ Ｈ 介导植物细胞内过量的 ＋外排，在植物抵御盐胁迫过程中起着重要的作用。唐古特白刺隶属于蒺藜科白 犛犗犛１ Ｎａ 刺属，是中国特有的盐生植物，主要生长于西北地区的荒漠或盐渍化荒漠，具有极强的抗逆能力。应用简并 ＋ ＋ 及 技术克隆获得唐古特白刺 ／ 逆向转运蛋白 基因（ 登录号 ）。 ＲＴ－ＰＣＲ ＲＡＣＥ Ｎａ Ｈ 犖狋犛犗犛１ ＧｅｎＢａｎｋ ＫＣ２９２２６７ 序列分析显示，该 ｃＤＮＡ全长４００８ｂｐ，包含３４９２ｂｐ的开放阅读框，编码分子量为１２７．５９ｋＤａ的蛋白质。疏水性 分析预测 基因编码蛋白 端具有 个跨膜结构域， 端具有一个面向胞质的长亲水尾部，包含保守环核 犖狋犛犗犛１ Ｎ １１ Ｃ 苷酸结合区域、自我抑制基序及磷酸化位点等多个活性调控结构域。犖狋犛犗犛１氨基酸序列与葡萄、霸王、拟南芥等 植物的 序列同源性较高，分别可达 ， ， 。系统发育分析表明 基因为质膜型 犛犗犛１ ７１．７７％ ６８．９４％ ６２．６５％ 犖狋犛犗犛１ ＋ ＋ ＋ ＋ ／ 逆向转运蛋白，与液泡型 ／ 逆向转运蛋白属于不同分支。半定量 结果显示冷、热、盐和 Ｎａ Ｈ Ｎａ Ｈ ＲＴ－ＰＣＲ 干旱胁迫都可以诱导 犖狋犛犗犛１基因的表达，同时，犖狋犛犗犛１基因随着盐处理浓度增加呈现出先上升（０ ３００ ～ ／）后下降（ ／）的趋势。结合植物的生境特点和 表达模式分析，该基因表达水平的升高可 ｍｍｏｌＬ ４００ｍｍｏｌＬ 犖狋犛犗犛１