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迟缓爱德华氏菌间接elisa快速检测法·研究简报-中国水产科学
第16卷第4期 中国水产科学 Vol.16 No.4
2 0 0 9 年 7 月 Journal of Fishery Sciences of China J u l y 2 0 0 9
·研究简报·
迟缓爱德华氏菌间接 ELISA 快速检测法
白方方，兰建新，王燕，韩茵，张晓华
（中国海洋大学 海洋生命学院 ，山东 青岛 266003）
：
摘要：以迟缓爱德华氏菌（ ）WY28作为抗原，免疫新西兰兔，获得效价为1 2 048的多克隆抗体；以此多克
Edwardsiella tarda
-
隆抗体作为一抗，山羊抗兔IgG HRP作为酶标二抗，建立迟缓爱德华氏菌的间接ELISA快速检测法。采用棋盘滴定法确定抗
6 -1
： ：
原与一抗的最佳工作浓度分别为10 CFU·mL 和1 10 000；酶标二抗的最适工作浓度为1 1 000。病原菌检测灵敏度为每
孔103 CFU。该方法标准化后具有快速、灵敏等特性，与肠杆菌科其他细菌参考菌株无交叉反应，具良好的特异性。对养殖
场发病大菱鲆（ ）和半滑舌鳎中分离的细菌菌株进行检测，从56株分离菌株中检测出27株迟缓爱德华
Scophthalmus maximus
% [
氏菌，阳性检出率为48.2 。该方法的建立有助于快速准确地诊断由迟缓爱德华氏菌引起的养殖鱼类病害。 中国水产科学，
2009，16（4）：619-625]
关键词：间接ELISA；迟缓爱德华氏菌；多克隆抗体；水产养殖；病原菌
中图分类号：S96 文献标识码：A 文章编号：1005-8737-（2009）04-0619-07
迟缓爱德华氏菌（ ）属肠杆菌 损失。目前对迟缓爱德华氏菌的检测方法仍然以常规
Edwardsiella tarda
科（Enterobacteriaceae），是中国水产养殖中具有极大危 的分离培养、生理生化鉴定及16S rDNA测序为主。常
[ ]
害的病原菌 1-3 。在鱼类中，迟缓爱德华氏菌的宿主 规方法具有检测时间长、敏感性低的不足，而酶联免
范围广，能够感染多种淡水和海水鱼类，包括大菱鲆 -
疫吸附法（Enzyme Linked Immunosorbent Assay，ELISA）
（ L.）、牙鲆（ ）、
Scophthalmus maximus Paralichthys olivaceus 具有特
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