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高效液相色谱-质谱联用法分析微生物降解植物甾醇为雄-微生物学报
微生物学通报 OCT 20, 2008, 35(10): 1674~1679
Microbiology © 2008 by Institute of Microbiology, CAS
tongbao@
生物实验室
高效液相色谱-质谱联用法分析微生物
降解植物甾醇为雄甾烯酮
*
沈 微 廖伟宏 饶志明 方慧英 诸葛健
( 214122)
摘 要: 采用高效液相色谱-质谱联用法(HPLC/MS)分析测定植物甾醇侧链降解过程中产物雄甾
-1,4-二烯-3,17-二酮(ADD)及雄甾 4-烯-3,17-二酮(AD) 。其中液相色谱的条件为色谱柱 Alltima C18
ODS-2(5 μm, 250 mm ×4.6 mm); 流动相甲醇:水( V/ V=7:3); 流速 1 mL/min; 柱温室温; 紫外检测器
的检测波长 244 nm 。质谱为 ZMD Micromass 电喷雾质谱仪。结果测得ADD 与 AD 标准样品的
保留时间分别为 9.70 min 与 11.13 min, 发酵样品的 HPLC 与 MS 图谱与ADD 与 AD 标准样品的
图谱一致。采用高效液相色谱法定量ADD 与 AD 的线性范围在 0.01 mg/mL ~ 0.09 mg/mL, 产物
回收率分别为 102.6%与 105.90%, 日内精密度分别为3.02%与 3.08%, 日间RSD 分别为 3.50%与
3.24%。该方法灵敏度高、选择性好、操作简便、定量准确, 适用植物甾醇微生物侧链降解过程中
产物的分析及产品质量控制。
关键词: 植物甾醇, 雄甾-4-烯-3,17-二酮, 雄甾-1,4-二烯-3,17-二酮, 液质联用
Preliminary Study of Bio-transformation of
Phytosterol by HPLC- MS
*
SHEN Wei LIAO Wei-Hong RAO Zhi-Ming FANG Hui-Ying ZHUGE Jian
(Key laboratory of Industrial Biotechnology, Ministry of Education, Research Center of Industrial Microorganisms,
School of Biotechnology, Jiangnan University , Wuxi 214122)
Abstract: The method for analysis and determination the cleavage of soybean sterol, in which the soybean
sterol was degraded and the products androst-1,4-diene-,17-dione (ADD) and androst-4-ene-3,17-dion (AD)
were developed by Liquid Chromatography-mass Spectrometry. The HPLC conditions adopted were: a All-
tima ODS-2 column (250 mm×4
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